Imunolocalização de supressores (FOXO3a e PTEN) e ativadores (Akt e phospho-Akt) da transição de folículos primordiais e primários em tecido ovariano humano

Autor: Higa, Thaís Tiemi
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2017
Předmět:
Druh dokumentu: Dissertação de Mestrado
Popis: Mulheres com risco de falência ovariana prematura, assim como aquelas diagnosticadas com câncer que desejam preservar sua fertilidade, têm como opção a criopreservação do tecido ovariano. Esse tecido seria destinado, dependendo do caso, ao reimplante posterior ou para o cultivo in vitro de folículos ovarianos isolados do tecido criopreservado. Nesse contexto, os folículos primordiais são uma população importante tanto por serem mais resistentes ao processo de criopreservação, como por representarem cerca de 90% da população total folicular. Porém o uso destes folículos para procedimentos de Reprodução Assistida ainda é bastante limitado, pois os mecanismos responsáveis pelo seu processo de ativação ainda não são completamente conhecidos. A via de sinalização fosfatidilinositol 3- quinase (PI3K) foi recentemente identificada como determinante para o controle da ativação dos folículos primordiais. Portanto o objetivo deste estudo foi identificar e localizar os fatores componentes da via: supressores (FOXO3a e PTEN) e ativadores (Akt e Phospho-Akt). O que ofereceria uma valiosa ferramenta para elucidar os mecanismos envolvidos na ativação do pool de reserva folicular e permitiria o desenvolvimento de sistemas de cultivo folicular que atuassem diretamente nestes mecanismos. Sendo assim, foi realizado um estudo transversal com amostras de tecido ovariano humano, que foram submetidas à reação imunohistoquímica dos fatores previamente citados. Foram incluídas na casuística 40 pacientes, com idade média de 27,7 anos ± 7,26. Foi realizada uma análise comparativa da expressão dessas proteínas entre os folículos primordiais e primários. Foi encontrada diferença significativa para a proteína Akt, (p
Women at risk of premature ovarian failure, as well as those diagnosed with cancer who wish to preserve their fertility, have, as option, the ovarian tissue cryopreservation. This tissue would be destined, depending on the case, to posterior reimplantation, or for the in vitro culture of ovarian follicles isolated from the cryopreserved tissue. In this context, primordial follicles are an important population of cells. As they are more resistant to the cryopreservation process and they represent about 90% of the whole follicular population. However, the use of these follicles for Assisted Reproduction procedures is still quite limited, since the mechanisms responsible for its activation process are not fully understood. The phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) signaling pathway has recently been identified as determinant for the control of primordial follicle activation. Therefore, the aim of this study was to identify and localize the components of this pathway: suppressors (FOXO3a and PTEN) and activators (Akt and phospho-Akt). This would offer a valuable tool to elucidate the mechanisms involved in the activation of the follicular reserve pool and would allow the development of in vitro culture protocols that would act directly in these mechanisms. Thus, a cross-sectional study with samples of human ovarian tissue was performed. These samples were submitted to the immunohistochemical reaction of the previously mentioned factors. Forty patients were included in the study, with a mean age of 27.7 ± 7.26. A comparative analysis of the expression of these proteins was performed between primordial and primary follicles. A significant difference was found for the Akt protein (p
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