'Análise do padrão de expressão do produto de PKHD1, o gene mutado na doença renal policística autossômica recessiva'
| Autor: | Menezes, Luis Fernando Carvalho de |
|---|---|
| Jazyk: | portugalština |
| Rok vydání: | 2004 |
| Předmět: |
BLOTTING WESTERN/methods
CÍLIOS/patologia IMMUNOHISTOCHEMISTRY/methods IMUNOHISTOQUÍMICA/métodos ISOFORMAS DE PROTEÍNAS/análise KIDNEY TUBULES COLLECTING/pathology KIDNEY TUBULES COLLECTING/physiopathology MEMBRANE PROTEINS/analysis MICROSCOPIA IMUNOELETRÔNICA/métodos/ MICROSCOPIA DE FLUORESCÊNCIA/méto MICROSCOPY FLUORESCENCE/methods MICROSCOPY IMMUNOELECTRON/methods POLYCYSTIC KIDNEY AUTOSOMAL RECESSIVE/etiology POLYCYSTIC KIDNEY AUTOSOMAL RECESSIVE/genetics POLYCYSTIC KIDNEY AUTOSOMAL RECESSIVE/physiopathology PROTEIN ISOFORMS/analysis PROTEÍNAS DE MEMBRANA/análise RIM POLICÍSTICO AUTOSSÔMICO RECESSIVO/etiologia RIM POLICÍSTICO AUTOSSÔMICO RECESSIVO/fisiopatologia RIM POLICÍSTICO AUTOSSÔMICO RECESSIVO/genética TÚBULOS COLETORES RENAIS/fisiopatologia TÚBULOS COLETORES RENAIS/patologia WESTERN BLOTTING/métodos |
| Druh dokumentu: | Tese de Doutorado |
| Popis: | O gene PKHD1, mutado na doença renal policística autossômica recessiva, apresenta um padrão de splicing complexo associado a múltiplos transcritos alternativos. Neste trabalho estudamos o perfil de expressão de seu produto, poliductina. Análises por western blot revelaram produtos putativos de membrana de > 440 kDa e ~230 kDa, e de ~140 kDa em frações solúveis de rim, fígado e pâncreas. Estudos imunoistoquímicos mostraram marcação em ductos coletores renais e porção ascendente espessa da alça de Henle, em epitélios ductais biliar e pancreático e, no período embrionário, em broto ureteral, ductos biliar e pancreático e glândula salivar. Análises por imunofluorescência e microscopia imunoeletrônica sugerem que poliductina se localize em cílio apical primário, membrana apical e citoplasma de células do ducto coletor. Nossos resultados indicam que PKHD1 codifica isoformas de membrana e solúveis PKHD1, the gene mutated in autosomal recessive polycystic kidney disease, presents a complex splicing pattern, associated with multiple alternative transcripts. In this work we have studied the expression profile of its product, polyductin. Western blot analysis revealed putative membrane products of > 440 kDa and 230 kDa, and of ~140 kDa in soluble fractions in kidney, liver and pancreas. Immunohistochemistry studies showed staining in renal collecting duct and thick ascending limb of Henle, in biliary and pancreatic ductal epithelia and, in the embryonic period, in ureteric bud, biliary and pancreatic ducts and salivary gland. Immunofluorescence and immunoelectron microscopy studies suggest that polyductin localizes to primary apical cilium, apical membrane and cytoplasm of collecting duct cells. Our data indicate that PKHD1 codifies membrane and soluble isoforms |
| Databáze: | Networked Digital Library of Theses & Dissertations |
| Externí odkaz: |
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