Seleção e caracterização de biomarcador aplicável em plataformas nanotecnologicas para o monitoramento do tratamento da tuberculose

Autor: Tafuri, Sebastião Marcos
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2013
Předmět:
Zdroj: Repositório Institucional da UFUUniversidade Federal de UberlândiaUFU.
Druh dokumentu: masterThesis
Popis: Introduction: Tuberculosis is an infectious disease that affects more than 9 million people each year worldwide. For tuberculosis control methods for the study of more accurate diagnostic and monitoring treatment, make it essential. Objectives: To identify biomarkers by Phage display technique and evaluate the immunoreactivity of the IG\'s clones selected sera from patients with tuberculosis to monitor treatment. Methods: Blood samples were collected from 61 individuals over 18 years, both sexes, and performed the tuberculin test ( PPD ) as a control. The samples were subjected to the process of selection of clones, the biopanning using a library of random 12 amino acid region of the protein expressed on the phage pIII. After selecting the ELISA assay was performed to analyze the immunoreactivity of selected clones. Results: after the in silico analysis, it was found that the sequence of clone F10 ( VYKTPNSTANRW ) has similarity to the membrane protein MPT64 low molecular weight, 28 to 32 kDa, immunogenicity of the M. tuberculosis complex. In ELISA clone F10 showed reactivity significant ( p < 0.05 ) and monitoring of individuals in treatment (P < 0.005). Conclusion : the reactivity of clone F10 demonstrated that it can be used for monitoring the treatment of tuberculosis, contributing to its control.
Introdução: A Tuberculose é uma doença infectocontagiosa, que acomete mais de 9 milhões de indivíduos a cada ano em todo o mundo. Para o controle da tuberculose o estudo por métodos de diagnósticos mais acurados e o monitoramento ao tratamento, tornam se imprescindíveis. Objetivos: identificar biomarcadores pela técnica de Phage display e avaliar a imunorreatividade dos clones selecionados ás igG\'s de soros de pacientes com tuberculose para o monitoramento do tratamento. Métodos: foram coletadas amostras de sangue de 61 indivíduos maiores de 18 anos, ambos os sexos, e realizada a prova tuberculina (PPD) como controle. As amostras foram submetidas ao processo de seleções de clones, o Biopanning, utilizando uma biblioteca de 12 aminoácidos randômicos expressos na região da proteína pIII do bacteriófago. Após a seleção foi realizado o ensaio ELISA para analisar a imunorreatividade dos clones selecionados. Resultados: após as análises in silico, observou-se que a sequência do clone F10 (V Y K T P N S T A N RW), possui similaridade com a proteína MPT64 de membrana de baixo peso molecular, 28 a 32 KDa, imunogênica do complexo M.tuberculosis. No ensaio ELISA o clone F10 apresentou uma reatividade significante ( p
Mestre em Ciências da Saúde
Databáze: Networked Digital Library of Theses & Dissertations
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