Reação Reversa em pacientes coinfectados HIV/ Hanseníase: avaliação de citocinas e fenótipos celulares envolvidos na resposta imuneinflamatória.

Autor: Oliveira, Ariane Leite de
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2012
Zdroj: Repositório Institucional da FIOCRUZFundação Oswaldo CruzFIOCRUZ.
Druh dokumentu: masterThesis
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Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Sabe-se que após o uso do HAART, pacientes com Hanseníase coinfectados pelo HIV podem apresentar episódios reacionais de Reação Reversa (RR). A ocorrência de RR nestes pacientes esta algumas vezes associada à síndrome inflamatória da restauração imune, conhecida como IRIS. A IRIS é caracterizada por uma restauração da resposta imune celular com aumento na frequência da resposta ao IFNγ e de citocinas pró-inflamatórias em resposta a antígenos micobacterianos resultando em um processo inflamatório exacerbado. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar o perfil imunológico de pacientes coinfectados HIV/Hanseníase com ênfase nos mecanismos imunopatogênicos que levariam ao desenvolvimento da RR. Para isto, foi avaliada a produção de IFNγ em PBMCs de pacientes RR e RR/HIV por ELISPOT. Paralelamente, foi realizada a dosagem de citocinas (TNFα, IL-6, IL-10 e IL-4) nos sobrenadantes das culturas por Cytometric bead array (CBA) e nas lesões de pele por PCR em tempo real. Além disso, foi avaliado o fenótipo de linfócitos T no sangue periférico por citometria de fluxo e nas lesões de pele por imunofluorescência. Em relação aos achados no sangue, foram observadas células produtoras de IFNγ em pacientes RR assim como, nos pacientes RR/HIV em resposta ao M. leprae indicando uma resposta imune efetiva ao bacilo nestes pacientes. Além de uma alta frequência basal de células produtoras de IFNγ, o grupo RR/HIV também apresentou uma alta secreção basal de TNFα e IL-6 concomitantemente com uma baixa secreção de IL-10. A análise do perfil de ativação dos linfócitos do sangue mostrou uma alta frequência basal de linfócitos T CD4+ e T CD8+ ativados no grupo RR/HIV comparado ao RR. Ainda em relação aos linfócitos periféricos, foi observada uma maior frequência de linfócitos T CD8+ TEM no grupo RR/HIV em resposta ao M. leprae além de uma alta frequência basal de linfócitos TEMRA tanto no grupo RR/HIV como no grupo RR. Além disso, células T CD8+ coexpressando CD38 com perfil TEMRA foram preferencialmente detectadas nas lesões de pacientes RR/HIV além de uma maior produção de granzima B e perforina por estas células na periferia. Estes dados indicam que a resposta imune mediada por linfócitos T CD8+ em pacientes RR/HIV pode ser um mecanismo efetivo de ação contra o M. leprae que levaria a uma intensa liberação antigênica resultando no apareciemento da RR nestes pacientes.
After HAART introduction, some patients with HIV/leprosy coinfection may experience Reversal Reaction (RR) episodes. The occurrence of RR in these patients can be associated with immune restoration inflammatory syndrome, known as IRIS. IRIS is characterized by a restoration of cellular immune responses, increasing IFNγ and proinflammatory cytokines productionin response to antigens, resulting in an intense inflammatory process. The aim of this study was evaluate the immunological profile of co-infected HIV/Leprosy patients wit emphasis on immunopathogenic mechanisms that lead to the development of RR. For this, purpose, we evaluated the production of IFNγ in PBMCs from RR and RR/HIV patients by ELISPOT. In parallel, we evaluated cytokine production (TNFα, IL-6. IL-10 and IL-4) in culture supernantants by cytometric bead array (CBA) and in skin lesion by real-time PCR. In addition, we evaluated the T lymphocytes phenotype in peripheral blood by flow cytometry and in patient’s lesions by immunofluorescence. In relationto the results in blood, were observed an increase in IFNγ-producing cells in RR as well as in RR/HIV patients in response to M. leprae indicating an effective immune response to bacillus in these patients. Besides this, were observed a high frequency of IFNγ in non-stimulated cells and high basal secretion of TNFα in RR/HIV group concomitantly with a low secretion of IL-10. The analysis of the activation profile of blood lymphocytes demonstrateshigh basal frequency of CD4+ and CD8+ activated T cells in RR/HIV group compared to RR. It was also observed a higher frequency of CD8+ TEM cell in RR/HIV group in response to M. leprae and a high basal frequency of both TEMRA lymphocytes in RR and RR/HIV groups. Additionally, CD8+ TEMRA coexpressing CD38 were preferentially detected in lesions of RR/HIV patients in addition to a greater production of granzyme B by these cells. These data indicate that the immune response mediated by CD8+ T lymphocytes in RR/HIV patients can be an effective mechanism against M .leprae that would lead to an intense release of antigen resulting in the appearance of RR in these patients.
Databáze: Networked Digital Library of Theses & Dissertations
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