Padronização de PCR multiplex para detecção de agentes infecciosos no sêmen ovino

Autor: KIM, Pomy de Cássia Peixoto
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2014
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPEUniversidade Federal Rural de PernambucoUFRPE.
Druh dokumentu: masterThesis
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In the present study it was standardized two Multiplex PCR reactions to detect DNA of Brucella sp., Leptospira sp., Actinobacillus seminis, Brucella ovis, Toxoplasma gondii and Neospora caninum. When used positive controls at a concentrations of less than 100ng/ml of genomic DNA it was clearly seen simultaneous amplification of all agents used on both of the reactions. Thereafter these reactions can now be implemented on our laboratory, that way we are going to be able to obtain faster, safer and less expensive diagnosis on those infectious agents.
Para otimizar o diagnóstico na detecção de agentes patogênicos no sêmen ovino comercializado, com risco potencial de transmissão venérea, objetivou-se neste estudo padronizar duas reações de PCR Multiplex, utilizando pares iniciadores sensíveis e específicos, uma reação para detectar o DNA dos gêneros Brucella sp. e Leptospira sp. e outra para detectar o DNA de Actinobacillus seminis, Brucella ovis, Toxoplasma gondii e Neospora caninum de forma simultânea em uma única reação. Foram utilizadas concentrações variáveis de DNA de cepas de referência para análise do limite de detecção das reações. Em ambas reações de mPCR, quando utilizados controles positivos em concentrações de DNA genômico igual ou inferior a 100ng/mL para cada espécie observou-se a amplificação simultânea de todos os agentes pesquisados, podendo assim, ser reproduzida na rotina laboratorial para obtenção de um diagnóstico mais rápido, seguro e menos dispendioso quando comparada a outros métodos de diagnóstico.
Databáze: Networked Digital Library of Theses & Dissertations
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