Caracterização fenotípica e genotípica de Escherichia coli isoladas de suínos abatidos no estado de Pernambuco, Brasil

Autor: SANTOS, André de Souza
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2014
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPEUniversidade Federal Rural de PernambucoUFRPE.
Druh dokumentu: masterThesis
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Aimed with the present study to analyze phylogenetically, detect the presence of virulence genes and plasmids, determine the antimicrobial susceptibility profile, and verify biofilm production in Escherichia coli strains isolated from healthy pigs slaughtered in Pernambuco state, Brazil. Bacteria isolated from intestinal content were subjected to biochemical tests. 126 strains were confirmed as Escherichia coli, which were subsequently analyzed by genotypic and phenotypic methods like polymerase chain reaction (PCR), electrophoresis, disk diffusion, and adhesion microplates test. The most common phylogenetic group was B1 with 88.10% (111/126) of the strains, followed by 4.76% in group D (6/126), 3.97% (5/126) in group B2, and 3.17% (4/126) in group A. 987P (F6) gene was the most common, found in 96.72 % (118/122) of strains that showed some virulence gene, and followed by BFP in 90.98% (111/122), K88 (F4) in 18.85% (23/122), and STb in 2.46% (3/122). LT, STa, STX2e, K99 (F5), and F18 genes were not detected in any of the strains. 46.03% (58/126) of the tested strains had plasmidial content, and in resistance evaluation test to antimicrobial drugs, all isolates were resistant to erythromycin and lincomycin, while chloramphenicol was the most efficient antibacterial drug in vitro. Multiple resistance index ranged from 0.2 to 0.9, determining multidrug resistance in 99.21% (125/126) of the strains. The ability to produce biofilm was detected in 46.03% (58/126) of the strains. This study was the first of its kind in Pernambuco state. Although the strains analyzed in this study come from healthy animals and most of them have been considered commensal, the presence of virulence genes, as well as high levels of multiple antimicrobial resistance warn about the risks of transmission of bacteria with this profile between livestock and human populations, reinforcing the need for more studies that encourage the adoption of appropriate health managements in herds and presenting alternatives to control these micro-organisms.
Objetivou-se neste estudo analisar filogeneticamente, detectar a presença de genes de virulência e de plasmídeos, determinar o perfil de sensibilidade a antimicrobianos e verificar a produção de biofilme em cepas de Escherichia coli isoladas de suínos hígidos abatidos no estado de Pernambuco, Brasil. A partir do cultivo de conteúdo intestinal coletado na linha de abate, isolados bacterianos foram submetidos a provas bioquímicas, sendo 126 confirmados como Escherichia coli, as quais posteriormente foram analisadas genotípica e fenotipicamente, pelos métodos de reação em cadeia da polimerase (PCR), eletroforese, teste de aderência em microplacas e disco difusão em ágar. O grupo filogenético mais frequente foi o B1, com 88,10% (111/126) dos isolados, seguido pelos grupos D com 4,76% (6/126), B2 com 3,97% (5/126) e A com 3,17% (4,126) dos isolados. O gene 987P (F6), presente em 96,72% (118/122) dos isolados que apresentaram algum gene de virulência, foi o mais frequente, seguido dos genes BFP em 90,98% (111/122), K88 (F4) em 18,85% (23/122) e STb em 2,46% (3/122) dos isolados positivos para genes de virulência. Os genes LT, STa, STX2e, K99 (F5) e F18 não foram detectados em nenhum dos isolados. Dos isolados testados, 46,03% (58/126) apresentaram conteúdo plasmidial e na avaliação da resistência aos antimicrobianos, todos os isolados foram resistentes à eritromicina e lincomicina, enquanto que o cloranfenicol foi a droga de maior eficiência in vitro. O índice de resistência múltipla (IRMA) variou de 0,2 a 0,9, determinando multirresistência em 99,21% (125/126) dos isolados. A capacidade de produzir biofilme foi detectada em 46,03% (58/126) dos isolados. Este foi o primeiro estudo desta natureza no estado de Pernambuco. Embora os isolados analisados no presente estudo sejam provenientes de animais hígidos e a maioria deles tenha sido considerada comensal, a presença de genes de virulência, bem como os elevados índices de resistência múltipla aos antimicrobianos alertam sobre os riscos da transmissão de bactérias com este perfil entre animais e humanos, reforçando a necessidade de mais estudos que incentivem a adoção de manejos sanitários adequados nos rebanhos e que apresentem alternativas no controle destes micro-organismos.
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