Estudo in vitro da infectividade de espécies de Leishmania do subgênero Viannia em macrófagos peritoneais de camundongo BALB/c
Autor: | CAMPOS, Marliane Batista |
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Jazyk: | portugalština |
Rok vydání: | 2003 |
Předmět: | |
Zdroj: | Repositório Institucional da UFPAUniversidade Federal do ParáUFPA. |
Druh dokumentu: | masterThesis |
Popis: | Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-04-08T18:20:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoVitroInfectividade.pdf: 46258236 bytes, checksum: e26a9da2a5c61477542b2e8eb278c3ba (MD5) Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-04-10T15:22:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoVitroInfectividade.pdf: 46258236 bytes, checksum: e26a9da2a5c61477542b2e8eb278c3ba (MD5) Made available in DSpace on 2013-04-10T15:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoVitroInfectividade.pdf: 46258236 bytes, checksum: e26a9da2a5c61477542b2e8eb278c3ba (MD5) Previous issue date: 2003 Os parasitos do gênero Leishmania apresentam variações de infectividade intra e inter específicas. Entretanto, são escassas as informações a respeito da infectividade das espécies de Leishmania do Novo Mundo, principalmente, daquelas encontradas na região Amazônica brasileira, onde, até o presente momento são conhecidas seis espécies pertencentes ao subgênero Viannia causadoras de LTA. Diante disso, o objetivo do presente trabalho foi investigar, in vitro, o comportamento da infectividade de 5 espécies de Leishmania do subgênero Viannia em macrófagos peritoneais de camundongos BALB/c e sua correlação com a produção de óxido nítrico pelos macrófagos infectados. Trinta cepas de Leishmania foram distribuídas em seis grupos iguais, de acordo com as espécies seguintes: I- L. (V) braziliensis/LCL, II- L. (V) braziliensis/LCM, III- L. (V) guyanensis, IV- L. (V) shawi, V -L. (V) naiffi e VI- L. (V) lainsoni. As cepas foram cultivadas em meio RPMI suplementado com 10% de soro bovino fetal e 1% de penicilina-gentamicina, até atingir a fase estacionária de cultivo, quando foram usadas para infectar macrófagos na proporção de 4 parasitos/macrófago. As culturas foram incubadas a 35°C e 5% de CO2 e após 24h, as lamínulas foram coradas com Giemsa para contagem do número de parasitos e determinação do índice de infecção, enquanto a concentração de NO (nitrito) foi calculada pelo método de Griess. Observou-se que as cepas de L. (V) braziliensis/LCM apresentaram o maior índice de infecção (385), sendo este significativamente maior (P Parasites ofthe genus Leishmania show both intra- and inter-specific variations of infectivity. There is little available information, however, regarding the infective behavior of New World species particularly those of the Amazon Region of Brazil, where there occur at six species of the subgenus Viannia causing human cutaneous leishmaniasis (ACL). The aim of the present study was to investigate the infectivity of 5 of these species for the peritoneal macrophages of BALB/c mice, and their role in the host-cell's production of nitric oxide (NO). Thirty strains of Leishmania were divided into 6 groups of the fol1owing species: I-L. (V.) braziliensis (from cases of localized skin lesions-LCL); II- L. (V.) braziliensis (from cases of mucocutaneous lesions- LeM); III- L. (V.) guyanensis; IV- L. (V.) shawi; V- L. (V.) naiffi and VI- L. (V.) lainsoni. They were cultivated in RPMI 1640 medium supplemented with 10% fetal bovine serum and 1% penicillin/gentamicin, until reaching the stationary phase of development. These promastigotes were used to infect the macrophage cell cultures, in the proportion of 4 flagellates/macrophage. The cultures were then incubated at 35°C with 5% CO2 and, after 24 hours following inoculation, the corvelips were stained by Giemsa's method to determine the infection index. The nitric oxide (nitrite) concentration was measured in the culture supernatant by Griess' s method to determine the infection index. The nitric oxide (nitrite) concentration was measured in the culture supernatant by Griess' s method. It was found that LCM strains of L. (V.) braziliensis showed the highest infection index (385), significance p |
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