Atividade antiparasitária in vitro do extrato e óleo extraídos da Siparuna guianensis e do alfa bisabolol isolado contra Strongyloides venezuelensis

Autor: Carvalho, Vanessa Fernandes
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2017
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFGUniversidade Federal de GoiásUFG.
Druh dokumentu: masterThesis
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
The strongyloidiasis is a neglected disease with prevalence underestimated, is caused mainly by the Strongyloides stercoralis species, is usually asymptomatic but potentially fatal in immunocompromised individuals. It is an infection difficult to diagnose due to low and irregular elimination of larvae, and with a high impact on public health. Among the drugs available for the treatment of strongyloidiasis are albendazole and ivermectin, but due to the side effects and the development of resistance has sought new therapeutic alternatives for the control of the genus Strongyloides sp are being studied. In this context, the objective of this study was to evaluate the anthelmintic potential of the ethanolic extract, ethyl acetate fraction, aqueous fraction, and essential oil rich in alpha bisabolol of S. guianensis as well as of the alpha bisabolol isolated in the control of S. venezuelensis. We carried out the Eggs Hatching Tests (EHT) and Larval Motility Tests (LMT) initially with ethanolic extract, essential oil and alpha bisabolol isolated at concentrations of 0.2 to 1.0 mg/mL, and finally fractionated ethyl acetate and aqueous fractions of ethanolic extract at concentrations of 0.05 to 0.8 mg/mL were tested. We used as positive controls, albendazole in EHT and ivermectin in LMT and as negative controls, filtered water and DMSO 1%. Fresh feces of gerbils were used to perform the EHT and stool culture in vermiculite for LMT. Was incubated with 50μL of tested compounds with eggs or larvae containing approximately 50 specimens in eppendorf tubesfor TEO and TML. The tests were performed in duplicate with the reply, and after incubation at 28 °C for 48 hours was performed counting the specimens in the EHT, and LMT, counts were performed at intervals of 24, 48 and 72 hours. The counts in the two tests were perfomed under optical microscopy. All the substances tested showed positive ovicidal activity equivalent to the positive control, and caused changes in the morphology of eggs. Only ethyl acetate and aqueous fractions showed a concentration-dependent effect in egg assays. In the TML, there was no time dependent relationship, only the ethanolic extract and the aqueous fraction of S. guianensis presented efficiency equivalent to the positive control. With the exception of alpha bisabolol alone, the other compounds had a concentration-dependent effect on TML. The higher concentration of the ethanolic extract caused changes in the cuticle of the analyzed larvae. The phytochemical tests of the ethanolic extract showed the presence of phenolic compounds, tannins and flavonoids. It is suggested from the results that there is synergism between the chemical constituents of the different compounds analyzed in the TEO and TML, and the presence of tannins and flavonoids in the ethanolic extract and its fractions influenced the observed ovicidal and larvicidal activity. It is concluded that S. guianensis showed in vitro antiparasitic potential mainly of the ethanolic extract and its fractions in the different forms of S. venezuelensis.
A estrongiloidíase é uma doença negligenciada com prevalência subestimada ocasionada principalmente pela espécie Strongyloides stercoralis, geralmente é assintomática, mas potencialmente fatal em indivíduos imunocomprometidos. Trata-se de uma infecção de difícil diagnóstico devido a eliminação de larvas discreta e irregular, e com alto impacto em saúde pública. Dentre os medicamentos disponíveis para o tratamento da estrongiloidíase, estão o albendazol e ivermectina, mas devido aos efeitos colaterais e o desenvolvimento da resistência, tem-se buscado novas alternativas terapêuticas para o controle do gênero Strongyloides sp. Neste contexto, o objetivo do estudo foi avaliar o potencial anti-helmíntico do extrato etanólico, fração acetato de etila, fração aquosa e óleo essencial rico em alfa bisabolol de Siparuna guianensis bem como do alfa bisabolol isolado no controle de S. venezuelensis. Realizou-se Testes de Eclosão de Ovos (TEO) e Testes de Motilidade Larval (TML) inicialmente com o extrato etanólico, óleo essencial e alfa bisabolol isolado nas concentrações de 0,2 à 1,0 mg/mL e, por fim, foram testadas as frações acetato de etila e aquosa fracionadas do extrato etanólico nas concentrações de 0,05 à 0,8 mg/mL. Foram utilizados como controles positivos o albendazol no TEO e a ivermectina no TML e, como controles, água filtrada e DMSO 1%. Foram utilizadas fezes frescas de gerbilos para realização do TEO e cultura de fezes em vermiculita para o TML. Foi incubado 50 μL dos compostos testados com ovos ou larvas contendo aproximadamente 50 espécimes em tubos eppendorfs para o TEO e TML. Os testes foram feitos em duplicata com réplica, e após incubação à 28°C por 48 horas realizou-se a contagem dos espécimes no TEO, e no TML, as contagens foram realizadas em intervalos de 24, 48 e 72 horas. As contagens nos dois testes foram realizadas em microscopia óptica. Todas as substâncias testadas apresentaram atividade ovicida equivalente ao controle positivo e, provocaram alterações na morfologia dos ovos. Apenas as frações acetato de etila e aquosa apresentaram efeito concentração dependente nos ensaios com ovos. No TML, não houve relação tempo dependente, apenas o extrato etanólico e a fração aquosa de S. guianensis apresentou eficiência equivalente ao controle positivo. Com exceção do alfa bisabolol isolado, os demais compostos apresentaram efeito concentração dependente no TML. A maior concentração do extrato etanólico provocou alterações na cutícula das larvas analisadas. Os testes fitoquímicos do extrato etanólico mostraram a presença de compostos fenólicos, taninos e flavonoides. Infere-se a partir dos resultados que existe sinergismo entre os constituintes químicos dos diferentes compostos analisados no TEO e TML e, que a presença de taninos e flavonoides no extrato etanólico e em suas frações influenciou na atividade ovicida e larvicida observada. Conclui-se que S. guianensis apresentou in vitro potencialidade antiparasitária principalmente do extrato etanólico e suas frações nas diferentes formas de S. venezuelensis.
Databáze: Networked Digital Library of Theses & Dissertations
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