Dantrolene e células-tronco mensenquimais no tratamento do trauma medular agudo em ratos Wistar

Autor: Bruno Benetti Junta Torres
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2014
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFMGUniversidade Federal de Minas GeraisUFMG.
Druh dokumentu: Doctoral Thesis
Popis: This study aimed to evaluate the effects of dantrolene (DAN) and mesenchymal stem cells (MSCs) in acute spinal cord injury (SCI). Sixty three-months-old male Wistar rats were divided into groups MSCs, MSCs + DAN, DAN, positive control (PC) (trauma and placebo) and negative control (NC) (no trauma and placebo). Laminectomy was performed at T12 level in all animals, followed by a weight-drop model of SCI, except for the NC group. An hour later, the MSCs + DAN and DAN groups received 10mg/kg of DAN in a single dose, intraperitoneally, and after seven days, the MSCs and MSCs + DAN groups received 1x106 cells intravenously. Functional recovery was assessed through BBB and adapted descriptive scale methods for 30 days. Spinal cord was evaluated with H.E., immunoistochemistry with anti-NeuN, and real time RTPCR to assess gene expression of neurotrophic factors (BDNF and NT-3), antiapoptotic (Bcl-2 and Bcl-xl) and pro-apoptotic proteins (caspase-3, caspase-9 and Bax), in the cranial and caudal segments from the lesion epicenter. Traumatized animals showed severe paraplegia and urinary retention with hemorrhagic cystitis. There was a significant recovery in groups MSCs, DAN and MSCs + DAN (p
Objetivou-se avaliar o efeito do dantrolene (DAN) e das células-tronco mesenquimais (CTM) no trauma medular agudo (TMA). Foram utilizados 60 ratos Wistar, machos com três meses de idade, divididos nos grupos CTM, DAN + CTM, DAN, controle positivo (CP) (trauma e placebo) e controle negativo (CN) (sem trauma e placebo). Realizou-se laminectomia de T12 em todos os grupos, seguida de TMA contusivo compressivo, com exceção do grupo CN. Uma hora depois, os grupos DAN + CTM e DAN receberam 10mg/kg de DAN em dose única, por via intraperitoneal e, após sete dias, os grupos CTM e DAN + CTM receberam 1x106 células, por via intravenosa. Testes comportamentais foram realizados para avaliar a recuperação funcional, por meio da escala de BBB e pelo método de escala descritiva adaptada, durante 30 dias. Para avaliação da medula espinhal foram realizadas histologia em H.E., imunoistoquímica com anti-NeuN e RT-PCR em tempo real para avaliar a expressão gênica dos fatores neurotróficos (BDNF e NT-3) e das proteínas antiapoptóticas (Bcl-2 e Bcl-xl) e pró-apoptóticas (caspase-3, caspase-9 e Bax), nos segmentos craniais e caudais ao epicentro da lesão. Os animais traumatizados apresentaram paraplegia grave e retenção urinária com cistite hemorrágica. Houve recuperação funcional significativa nos grupos tratados com CTM, DAN ou associação (p
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