| Popis: |
Desenvolveu-se neste trabalho, um ensaio imunoenzimático (ELISA) que permite detectar, diferenciar e quantificar antígenos presentes na peçonha de serpentes da família Crotalidae mais frequentes no território brasileiro, em soro de humanos acidentados por estas serpentes. O ensaio tornou-se realizável utilizando um processo desenvolvido em nosso laboratório onde imunoglobulinas G dos soros de cavalos ou coelhos hiperimunizados com os diferentes venenos: Bothrops spp, Crotalus durissus, Bothrops atrox, Lachesis muta muta e toxinas do veneno crotálico: crotamina e crotoxina, que reconhecem componentes imunologicamente comuns presentes nos venenos de serpentes de diferentes gêneros ou espécie, foram separadas por técnicas de imunoafinidade. Foram obtidas imunoglobulinas G que reconhecem especificamente apenas o veneno de um gênero ou espécie. Estas imunoglobulinas foram utilizadas no método de ELISA -Sanduíche para sensibilização de placas e produção de conjugados. Observou-se ser possível diferenciar (através do ensaio de ELISA) antígenos próprios das serpentes L. muta muta ou B. atrox (região Amazônia), no sangue de pacientes picados por de cada um destas espécies e assim identificar a serpente responsável pelo acidente. Procedimento idêntico permitiu identificar antígenos das serpentes do gênero Bothrops utilizados para produção do soro antiofídico (especificamente B. jararaca), e diferenciar acidentes provocados por estas serpentes daqueles provocados pelo gênero Crotalus. Além disso, permite diferenciar toxinas específicas do veneno crotálico (crotoxina e crotamina). Pelo processo que desenvolvemos, foi possível acompanhar a cinética de neutralização do veneno dos Crotalideos mencionados e estabelecer correlação entre a concentração de antígenos tóxicos presentes no sangue de pacientes e a gravidade do acidente avaliada clinicamente pelos sinais e sintomas observados. Conclui-se que esse método pode ser útil a médicos e epidemiologistas no diagnóstico e tratamento dos acidentes ofídicos e no estudo dos mecanismos de ação dos venenos em animais inoculados experimentalmente. |
