Caspase 3, Caspase 8, Bax e Bcl2 em polpas de dentes decíduos humanos com reabsorção radicular fisiológica avaliadas por PCR em tempo real e imunoistoquímica
| Autor: | Luciana Villela Rodrigues |
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| Jazyk: | portugalština |
| Rok vydání: | 2012 |
| Zdroj: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFMGUniversidade Federal de Minas GeraisUFMG. |
| Druh dokumentu: | Doctoral Thesis |
| Popis: | Physiological root resorption is a programmed event that takes place in primary teeth leading to elimination of all root structures. Through this phenomenon the primary teeth lose support at oral cavity given place to the permanent dentition. The mechanism behind pulp elimination indicates apoptosis but its pathway has not been well characterized yet. To better understand this event, we evaluated the gene expression of bax, bcl-2, caspases 3 and 8 through real-time polymerase chain reaction (PCR) and morphometrically the protein expression of Caspase 8, Caspase 3, Bcl-2 and Bax in primary pulps by immunohistochemistry reaction. Samples were split into two groups: pulps from primary teeth with physiological root resorption (n=40) and control (n=40), pulps from permanent teeth. Samples of each group were split into PCR (n=20) and immunohistochemistry (n=20). PCR results showed a higher caspase 3 mRNA level in primary teeth than in pulps from permanent teeth. The expression of bax gene was more intense than caspase 8 but both did not show difference between groups. The bcl2 mRNA level was incipient and similar between groups. Pulps from primary teeth showed a high Caspase 3 and Bax immunoexpression. Immunolabeling to Caspase 8 was less intense, which implies that extrinsic via is not likely to be involved. Compared to Bax expression, immunolabeling to Bcl2 was incipient. These results were similar but less intense in pulps of permanent teeth. In conclusion, immunolabeling to Caspase 3 and Bax associated with a higher expression of these genes in pulps of primary teeth indicate that mitochondrial pathway apoptosis play a role in pulpar elimination during physiological root resorption. A reabsorção radicular fisiológica é um evento programado que acomete dentes decíduos humanos. Trata-se da eliminação fisiológica das raízes deste grupo dentário o qual perde sustentação na cavidade bucal dando lugar à dentição permanente. A apoptose é indicada como responsável pela eliminação pulpar, porém as vias apoptóticas envolvidas ainda não foram descritas. Para melhor entender este evento foram quantificados os níveis de mRNA dos genes bax, bcl-2, caspases 3 e 8 através da reação em cadeia da polimerase em tempo real (PCR) e a expressão das proteínas Bax, Bcl2, Caspase 3 e 8, por meio de reações imunoistoquímicas em amostras pulpares. As amostras foram divididas em dois grupos: um grupo de polpas de dentes decíduos humanos (n=40), com reabsorção radicular fisiológica e um grupo controle (n=40), formado por amostras pulpares de terceiros molares superiores. Destas, 20 amostras de cada grupo foram submetidas ao PCR e o restante às reações imunoistoquímicas. Resultados da PCR em tempo real mostraram alta expressão de caspase 3 em polpas de dentes decíduos quando comparado com as de dentes permanentes, além de expressão mais intensa de bax do que de caspase 8 em ambos os grupos, porém sem diferença significante entre eles. A expressão de bcl2 foi incipiente e similar entre os grupos. Verificou-se ampla marcação imunohistoquímica para Caspase 3 e Bax nas amostras pulpares de dentes decíduos com menor expressão de Caspase 8. Estes resultados se repetiram de maneira discreta nas amostras pulpares de dentes permanentes. Não houve marcação com o anticorpo anti-Bcl2 em ambos os grupos. Considerando a mais ampla marcação imunoistoquímica de Caspases 3 e Bax, a maior expressão gênica de caspase 3 e de bax do que caspase 8 em polpas de dentes decíduos pode-se concluir que a apoptose, importante mecanismo de eliminação pulpar durante a reabsorção radicular fisiológica de dentes decíduos humanos, ocorre através da ativação de Caspase 3 pela via mitocondrial. |
| Databáze: | Networked Digital Library of Theses & Dissertations |
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