| Autor: |
王鹏, 吴燕峰, 黄文林, 唐勇, 黄霖, 杨睿, 沈慧勇 |
| Jazyk: |
čínština |
| Rok vydání: |
2006 |
| Předmět: |
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| Zdroj: |
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, Vol 27 (2006) |
| Druh dokumentu: |
article |
| ISSN: |
1672-3554 |
| Popis: |
【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA，使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序，将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中，然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM 2000法转染HEK293细胞包装携带BDNF目的基因的重组腺病毒，少量提取重组腺病毒DNA检测证实为复制缺陷型BDNF基因重组腺病毒后大量扩增。蛋白电泳及Western blot法初步检测BDNF目的基因在HEK293细胞中的表达。【结果】成功构建了携带大鼠BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒。并证实其在HEK293细胞中可高水平表达BDNF目的基因。【结论】利用体外连接法可方便、快捷地构建携带BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并可在体外高水平表达表达其所携带的目的基因。 |
| Databáze: |
Directory of Open Access Journals |
| Externí odkaz: |
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