Genótipo e expressão da proteína fluorescente verde melhorada em ratos da linhagem LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc

Autor: Renata Cristina Higino Brito, Juliana Lott de Carvalho, Alessandra Arcoverde Cavalcanti Zonari, Natalia Martins Breyner, Luiza Carvalho, Dawidson Assis Gomes, Alfredo Miranda Goes
Jazyk: English<br />Portuguese
Rok vydání: 2013
Předmět:
Zdroj: Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, Vol 50, Iss 2 (2013)
Druh dokumentu: article
ISSN: 2318-3659
1413-9596
1678-4456
DOI: 10.11606/issn.2318-3659.v50i2p87-97
Popis: A proteína fluorescente verde (GFP) foi descrita pela primeira vez após ter sido extraída de Aequorea victoria em 1987. Desde então, a GFP e seus derivados têm sido amplamente utilizados em várias experiências como marcador celular e de proteínas. O objetivo do presente estudo foi o de verificar o genótipo dos descendentes de cruzamentos entre ratos Lewis LEW-Tg (EGFP) F455.5/Rrrc heterozigotos e de analisar a expressão da proteína fluorescente verde melhorada (EGFP) em diferentes tipos celulares e genótipos. O genótipo da descendência foi avaliado por PCR e pela análise da expressão da EGFP em diferentes células e genótipos, incluindo-se as células-tronco mesenquimais (MSC) derivadas de tecido adiposo e de osteoblastos de calvária. A expressão da EGFP foi verificada por citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e imunocoloração. Foram, identificados os genótipos da descendência e determinados os níveis de expressão de EGFP em dois tipos de células. Foi também constatada uma diferença de expressão entre os genótipos (EGFP +/+) e (EGFP +/-) além da presença de autofluorescência. Mais estudos são necessários para esclarecer a fluorescência natural de células com o genótipo (EGFP +/-) e aquela induzida pela presença da EGFP.
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