Efeito da rutina sobre a maturação in vitro de oócitos de ovelhas obtidos de folículos pré-antrais cultivados in vitro

Autor: Maria Lilian Gomes Loiola Torres, Kíscyla Oliveira de Andrade, Regina Lucia dos Santos Silva, Alane Pains Oliveira do Monte, Valéria da Silva Guimarães, Joãozito Liandro Oliveira Junior, Luanna Mendes Souza, Gabriela Cristina da Silva Santos, Anna Thaylla Venceslau França, Maria Helena Tavares de Matos
Jazyk: English<br />Portuguese
Rok vydání: 2024
Předmět:
Zdroj: Semina: Ciências Agrárias, Vol 45, Iss 1 (2024)
Druh dokumentu: article
ISSN: 1679-0359
1676-546X
DOI: 10.5433/1679-0359.2024v45n1p207
Popis: Os objetivos deste estudo foram verificar o efeito da rutina sobre a maturação in vitro (MIV) de oócitos provenientes de folículos secundários de ovelhas cultivados in vitro e analisar o possível envolvimento da via mTOR na MIV, sob influência da rutina. Os folículos secundários foram cultivados por 18 dias em meio α-Mínimo Essencial (α-MEM) suplementado com albumina sérica bovina (BSA), insulina, glutamina, hipoxantina, transferrina, selênio, ácido ascórbico e leptina (meio controle: α-MEM+). Em seguida, os folículos foram avaliados quanto à morfologia, formação do antro e diâmetro folicular e taxa de oócitos totalmente crescidos (≥110 µm). Oócitos totalmente crescidos foram submetidos à MIV em meio de cultivo de tecidos 199 (TCM199) suplementado com soro fetal bovino (FBS), hormônio luteinizante (LH), hormônio folículo estimulante recombinante (rFSH) (meio controle MIV) ou neste meio com 0,1, 1 ou 10 µg.mL-1 de rutina. Ao final da MIV, os oócitos foram avaliados quanto à atividade mitocondrial, concentração de espécies reativas de oxigênio (ERO) e glutationa (GSH), porcentagem de retomada de meiose, fragmentação de DNA e envolvimento da via mTOR. Após 18 dias de cultivo in vitro, 77,5% dos folículos estavam normais e 77,7% tornaram-se folículos antrais, com 380,41 µm de diâmetro. Além disso, 70% dos oócitos que cresceram in vitro atingiram diâmetro ≥110 µm e foram submetidos à MIV. A concentração de 10 µg.mL-1 de rutina aumentou significativamente a porcentagem de oócitos que retomaram a meiose (47,27%) em comparação ao meio controle (30,43%). Houve um aumento significativo nas concentrações de ROS e GSH em oócitos maturados com 0.1 µg.mL-1 de rutina em comparação com os outros tratamentos com rutina (p < 0,05). Além disso, a maturação de oócitos em TCM199+ aumentou (p0,05). Em conclusão, a concentração de 10 µg.mL-1 de rutina aumentou a retomada da meiose e reduziu os danos ao DNA.
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