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【目的】探讨温度、pH、盐浓度对甲氧西林耐药金葡菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus, MRSA)青霉素结 合蛋白2a( penicillin-binding protein,PBP)表达的影响, 以及 PBP2a编码基因 MecA 的检测价值。【方法】采用聚合酶链式反应 ( PCR)检测 M RSA 特异性 MecA 基因和美国临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的琼脂板稀释法( 32℃,pH7. 2,40 g/L NaCl 苯唑西林 MIC≥4 mg/L)筛选 MRSA。检测 20株 MRSA 在不同温度、pH、盐浓度时对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶的体外 药物敏感性,测定 M IC 范围,MIC50和 MIC90 ; SDS-PAGE 分析 10 株 MRSA 膜青霉素结合蛋白( PBP2a)在不同培养条件时表达 数量的差异,并进行配对差值的 t 检验。【结果】180 株金葡菌检测出 MecA 基因阳性 MRSA 56 株 ,按琼脂板稀释法检出 52 株M RSA, 4株未被检出(苯唑西林 MIC 分别为: 2,2,1,0. 5 mg/L) ,37 ℃、pH 5. 2 和 9 g/L NaCl 分别与 32 ℃、pH 7. 2 和 40 g/ L NaCl条件下诱导 10 株 MRSA, 所表达的 PBP2a含量前后比较差值有显著性(P∶ 0. 02～ 0. 05, 0. 01～ 0. 005, 0. 02～ 0. 05)。 【结论】不同温度、pH、盐浓度通过诱导耐药蛋白 PBP2a的表达明显影响 MRSA 对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶耐药水平, 而 其 MecA 基因却不受培养条件的影响,可以快速检测 M RSA 感染。 |
