Desarrollo de un inmuno-ensayo enzimático (ELISA) para el diagnóstico de paratuberculosis en bovinos

Autor: Adriana Guadalupe Martínez Covarrubias, Marco Antonio Santillán Flores, Claudia Celic Guzmán Ruiz, Lucía del Carmen Favila Humara, Dionicio Córdova López, Efrén Díaz Aparicio, Laura Hernández Andrade, Miguel Ángel Blanco Ochoa
Jazyk: English<br />Spanish; Castilian
Rok vydání: 2012
Předmět:
Zdroj: Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias, Vol 3, Iss 1 (2012)
Druh dokumentu: article
ISSN: 2007-1124
2448-6698
Popis: Los objetivos del trabajo fueron estandarizar y desarrollar un ELISA con antígeno protoplasmático obtenido de una cepa de Mycobacterium avium paratuberculosis (Map) 3065 de origen ovino, para el diagnóstico de paratuberculosis en bovinos. El antígeno se fijó en las placas a concentraciones de 10, 5, 2.5 y 1.25 µg/100 µl y se probaron diluciones de los sueros control positivo y negativo de 1:20,1:40, 1:80 y 1:160. El punto de corte se estableció con un intervalo de confianza del 95 % y dos desviaciones estándar. Para determinar la sensibilidad y especificidad del ELISA se trabajó con 491 sueros de bovinos, así como también, se colectaron muestras de heces para efectuar el aislamiento bacteriológico, y la prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada para la detección de Map. Los resultados de las tres pruebas fueron analizadas para determinar la asociación o concordancia por medio de una prueba de Kappa La concentración de antígeno y suero que dieron mejor diferencia entre los controles fue de 1.25 µg/100 µl antígeno y la dilución del suero 1:160, el punto de corte se estableció a una densidad óptica de 0.16, la sensibilidad que se obtuvo fue 79.31 %, la especificidad 82.25 % y el índice de concordancia de 0.2763 del ELISA con respecto al cultivo. Los resultados obtenidos permiten recomendar el ELISA con antígeno protoplasmático de la cepa de Map 3065, como una alternativa para el diagnóstico de la paratuberculosis en bovinos.
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