کلونینگ و تعیین توالی ژن کد کننده آنتی ژن اصلی سطحی (SAG1) توکسوپلاسما گونده ای

Autor: عبدالحسین دلیمی, ف. غفاری فر, ک. صلحجو, ز. شریفی
Jazyk: English<br />French
Rok vydání: 2006
Předmět:
Zdroj: Archives of Razi Institute, Vol 61, Iss 2, Pp 73-79 (2006)
Druh dokumentu: article
ISSN: 0365-3439
2008-9872
DOI: 10.22092/ari.2006.103786
Popis: در سالهای اخیر روشهای دسته بندی ژنتیکی سویه های توکسوپلاسما گونده ای بطور گسترده ای انجام شده است. از نقطه نظر تکنیکی, روشهای کاربردی زیادی برای مطالعه ژنتیکی روی لوکوسهای تک- کپی (Single-copy) همچونRFLP, PCR-RFLP, تعیین توالی (Sequencing), RAPD-PCR و آنالیز ایزوآنزیمی بکار گرفته شده است. ما در این تحقیق کلونینگ و تعیین توالی ژن کد کننده آنتی ژن اصلی سطحی (P30 یاSAG1) توکسوپلاسما گونده ای را بررسی نمودیم. SAG1آنتی ژن ایمنودومینانت تاکی زوئیت های توکسوپلاسما گونده ای است و به عنوان اصلی ترین مولکول در تهیه واکسن های نوترکیب و واکسن های DNA علیه بیماری توکسوپلاسموزیس می‌باشد. در این تحقیق, ابتدا DNA ژنومی توکسوپلاسما گونده ای استخراج گردید و به عنوان الگو برای PCR ژن SAG1 استفاده شد. سپس محصول PCR درون پلاسمید pTZ57R/T کلون شد و پلاسمید نوترکیب حاوی ژن (pT-SAG1) SAG1 از باکتریهای ترانسفورم شده استخراج و ژن SAG1 کلون شده در پلاسمید PT-SAG1 تعیین توالی شد. نتایج نشان داد که ژن P30 اینترون ندارد و می‌تواند از DNA ژنومی مرحله تاکی زوئیت جدا شود. همچنین نتایج نشان داد که ژن SAG1 در پلاسمید pTZ57R/T کلون شده است و پلاسمید نوترکیب تولید شده است و باکتری E.coli سویهTG1 بهترین میزبان برای ترانسفورماسیون پلاسمید pT-SAG1 جدا شده از سویه با حدت توکسوپلاسما گونده ای(معروف بهRH), شباهت صد در صدی با سویه P-Br, سویهP و سویه C دارد و با سویه RH و سویه ZS1 شباهت 98 درصدی دارد.
Databáze: Directory of Open Access Journals