کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
| Autor: | احمد رضا جباری, سهیلا مرادی بیدهندی, پژواک خاکی, رضا پیله چیان لنگرودی, زهرا بزرگخو, محسن موسوی شوشتری |
|---|---|
| Jazyk: | English<br />French |
| Rok vydání: | 2014 |
| Předmět: | |
| Zdroj: | Archives of Razi Institute, Vol 69, Iss 1, Pp 15-20 (2014) |
| Druh dokumentu: | article |
| ISSN: | 0365-3439 2008-9872 |
| DOI: | 10.7508/ari.2014.01.002 |
| Popis: | کلستریدیوم سپتیکوم یک باکتری گرم مثبت بی هوازی است که تعدادی توکسین از جمله آلفا، بتا، گاما و دلتا را تولید می کند. آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم کشنده بوده و مسئول بیماری بسیار خطرناک قانقرایای گازی است. هدف مطالعه حاضر کلونینگ ملکولی و توالی یابی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسینال(CN913) است. از سوسپانسیون کشت شبانه باکتری، DNA ژنومیک به وسیله روش استاندارد فنل کلروفرم تخلیص و ژن آلفا توکسین با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده و به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر شد. کمّیت و کیفیت محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از الکتروفورز ژل آگارز تعیین و به روش اسپکتروفوتومتری تائید گردید. محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز تخلیص ودر وکتورکلونینگ pJET1.2blunt لایگیت شد. سپس سلول مستعد E. coli/TOP10 به وسیله آن ترانسفورم گردید. پلاسمید نوترکیب pJETαsep از کلونE. coli/TOP10/pJETαsep تخلیص و ژن آلفا توکیسن به وسیلۀ پرایمرهای یونیورسال توالی یابی شد. توالی یابی و آنالیز بلاست ژن csa بیش از 99% تشابه را با سایر ژنهای csa موجود در بانک ژن نشان داد. این توالی با شماره JN793989 در بانک ژن ثبت گردید. از سویه E. coli/TOP10/pJETαsep می توان به عنوان یک کلون نوترکیب باکتریائی برای تخلیص ژن csa و بیان آن در میزبان مناسب استفاده نمود. |
| Databáze: | Directory of Open Access Journals |
| Externí odkaz: |
|