Detecção de Leptospira pomona em sêmen bovino por eletroforese capilar fluorescente
| Autor: | Francisca Elda Ferreira Dias, Sérgio Morais Aoki, Lígia Garcia Mesquita, Caris Maroni Nunes, José Fernando Garcia |
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| Jazyk: | English<br />Portuguese |
| Rok vydání: | 2006 |
| Předmět: | |
| Zdroj: | Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, Vol 43, Iss 3 (2006) |
| Druh dokumentu: | article |
| ISSN: | 1678-4456 1413-9596 |
| DOI: | 10.11606/issn.1678-4456.bjvras.2006.26488 |
| Popis: | Este estudo pretendeu avaliar o limiar de detecção da técnica de PCR aliada à eletroforese capilar para diagnóstico da Leptospira pomona em sêmen bovino. Doses inseminantes livres de patógenos foram contaminadas experimentalmente com Leptospira pomona em escalas que variavam de 10(0) a 10(7) bactérias/ml e submetidas à extração de DNA pelo método de fenol/clorofórmio. Após a reação de PCR, a visualização dos fragmentos foi realizada em três tipos de eletroforese: agarose 2% sob luz UV, acrilamida 8% corado com prata e eletroforese capilar fluorescente. A detecção de DNA de Leptospira pomona em sêmen bovino através de eletroforese capilar fluorescente foi possível a partir de concentração de 10² bactérias/ml. Nos métodos de eletroforese em agarose 2%, observou-se limite de detecção de 10(4) bactérias/ml e em gel de poliacrilamida 8% o limite de detecção foi de 10² bactérias/ml. A eletroforese capilar demonstrou ser uma alternativa eficaz e rápida na detecção de DNA de Leptospira em sêmen bovino podendo ser uma valiosa ferramenta para controle de qualidade do sêmen produzido em centrais de inseminação artificial dada a facilidade de automação desse processo. |
| Databáze: | Directory of Open Access Journals |
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