OBTENCIÓN DE UN SUB-PROTEOMA DE CITOPLASMA DE UNA LÍNEA CELULAR DE TROFOBLASTO MEDIANTE FRACCIONAMIENTO CON DETERGENTES
Autor: | Sandra Susana Novoa-Herrán, Myriam Sánchez-Gómez |
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Jazyk: | English<br />Spanish; Castilian |
Rok vydání: | 2023 |
Předmět: | |
Zdroj: | Revista de la Academia Colombiana de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales, Vol 35, Iss 136 (2023) |
Druh dokumentu: | article |
ISSN: | 0370-3908 2382-4980 |
DOI: | 10.18257/raccefyn.35(136).2011.2507 |
Popis: | El método de fraccionamiento con detergentes descrito por Rambsy y Makowski en 1999, fue modificado utilizando un buffer con digitonina (0,015%) para permeabilizar células HTR8/SVneo de trofoblasto humano, extrayendo las proteínas de citoplasma en la fracción soluble y solubilizando las de membrana a partir del precipitado con un buffer con Tritón X-100 (0,5%). Se obtuvo un extracto reproducible de proteínas citoplasmáticas libre de proteínas de membrana y se adecuó para electroforesis bidimensional (2-DE) por precipitación con clorofomo/metanol. En conclusión, el método aquí descrito resulta adecuado para la obtención de sub-proteomas de citoplasma a partir de líneas celulares, con una reproducibilidad y recuperación óptimas para el análisis de perfiles proteómicos por electroforesis bidimensional. |
Databáze: | Directory of Open Access Journals |
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