OBTENCIÓN DE UN SUB-PROTEOMA DE CITOPLASMA DE UNA LÍNEA CELULAR DE TROFOBLASTO MEDIANTE FRACCIONAMIENTO CON DETERGENTES

Autor: Sandra Susana Novoa-Herrán, Myriam Sánchez-Gómez
Jazyk: English<br />Spanish; Castilian
Rok vydání: 2023
Předmět:
Zdroj: Revista de la Academia Colombiana de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales, Vol 35, Iss 136 (2023)
Druh dokumentu: article
ISSN: 0370-3908
2382-4980
DOI: 10.18257/raccefyn.35(136).2011.2507
Popis: El método de fraccionamiento con detergentes descrito por Rambsy y Makowski en 1999, fue modificado utilizando un buffer con digitonina (0,015%) para permeabilizar células HTR8/SVneo de trofoblasto humano, extrayendo las proteínas de citoplasma en la fracción soluble y solubilizando las de membrana a partir del precipitado con un buffer con Tritón X-100 (0,5%). Se obtuvo un extracto reproducible de proteínas citoplasmáticas libre de proteínas de membrana y se adecuó para electroforesis bidimensional (2-DE) por precipitación con clorofomo/metanol. En conclusión, el método aquí descrito resulta adecuado para la obtención de sub-proteomas de citoplasma a partir de líneas celulares, con una reproducibilidad y recuperación óptimas para el análisis de perfiles proteómicos por electroforesis bidimensional.
Databáze: Directory of Open Access Journals