Incorporación química de la sonda fluorescente FlAsH en la proteína Hha: aplicación al estudio del complejo Hha/H-NS
| Autor: | Catalina Granados Acevedo, Tiago Cordeiro, Miquel Pons |
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| Jazyk: | English<br />Spanish; Castilian |
| Rok vydání: | 2009 |
| Předmět: | |
| Zdroj: | NOVA, Vol 7, Iss 11 (2009) |
| Druh dokumentu: | article |
| ISSN: | 1794-2470 2462-9448 24629448 |
| DOI: | 10.22490/24629448.412 |
| Popis: | El objetivo de esta investigación fue realizar estudios de incorporación de la sonda FlAsH como posible herramienta para el estudio in vitro e in vivo de la proteína Hha y de su interacción con H-NS. Se construyó una proteína con la secuencia específica “CCPGCC” capaz de unir la sonda fluorescente FlAsH; posteriormente se desarrollaron procesos de transformación, expresión y purificación, con los cuales se evidenció que a pesar de introducir una secuencia adicional no nativa a la proteína, se pudo obtener proteína en buena cantidad, estabilidad, rendimiento y con un alto nivel de pureza. La optimización del protocolo de incorporación del FlAsH se hizo teniendo en cuenta el rendimiento y el tiempo de reacción. El complejo FlAsH/HhaCCPGCC se caracterizó mediante fluorescencia y se comprobó mediante MALDI TOF. La incorporación HhaCCPGCC1/ FlAsH no se obtuvo en un alto porcentaje como se esperaba, por esta razón no se pudieron hacer los estudios de interacción entre el complejo de proteínas Hha y H-NS. |
| Databáze: | Directory of Open Access Journals |
| Externí odkaz: |
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