Molecular heterogeneity of Malassezia pachydermatis through RAPD-PCR = Heterogeneidade molecular da Malassezia pachydermatis através de RAPD-PCR
Autor: | Patrícia da Silva Nascente, Helen Silveira Coimbra, Ana Raquel Mano Meinerz, Mário Carlos Araújo Meireles, João Roberto Braga Mello, Luiz Filipe Damé Schuch |
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Jazyk: | angličtina |
Rok vydání: | 2010 |
Předmět: | |
Zdroj: | Acta Scientiarum: Biological Sciences, Vol 32, Iss 2, Pp 169-173 (2010) |
Druh dokumentu: | article |
ISSN: | 1679-9283 1807-863X |
Popis: | Several methodologies in molecular biology have been used in theinvestigation of Malassezia pachydermatis and its differentiation into subtypes. Recent molecular research of this species includes the use of samples isolated from canine otitis externa and dermatitis, as well as from healthy animals, having in view an epidemiologicalstudy of the yeast. The aim of this study was to identify molecular differences in M. pachydermatis samples isolated from dogs with otitis externa. The M. pachydermatis strains were analyzed by means of the Random Amplification Primer DNA - Polimerase Chain Reaction (RAPD–PCR) for molecular heterogeneity research. DNA extraction was carried out with phenol-chloroform and the RAPD technique using the AGAATCCGCC primer. A variation was observed in the number and arrangement of the bands among the 49 studied isolates, grouped into nine patterns. Isolate groupings were not found to be related to animal breed, age or sex. It was concluded that M. pachydermatis has differences in its molecular profile, as shown by the molecular technique (RAPD – PCR), which allows isolates to be classified into nine subtypes.Várias metodologias em biologia molecular têm sido aplicadas para estudar a M. pachydermatis diferenciando-a em subgrupos. Recentemente utiliza-se a investigação molecular desta espécie isolada de otite externa e dermatite, e também de isolados da mesma de animais hígidos, para um estudo epidemiológico da levedura. O objetivo deste trabalho foi identificar diferenças moleculares entre isolados de M. pachydermatis obtidos de casos de otite externa canina. Para isto, amostras da levedura provenientes de cães com esta enfermidade foram estudadas através da técnica de Polimorfismo de DNA Amplificado aoAcaso - Reação da Polimerase em Cadeia (RAPD–PCR) para pesquisa de heterogeneidade molecular. A extração de DNA foi realizada no processo fenol-cloroformio e a técnica de RAPD foi estudada com o primer AGAATCCGCC. Pode-se observar com esta metodologia, variação no número e posição das bandas entre os 49 isolados estudados, podendo-se agrupá-los em nove padrões. Os agrupamentos formados pelos isolados não apresentaram relação com raça, idade ou sexo do animal. Concluindo-se que a M. pachydermatis apresenta diferenças em seu perfil molecular, observado pela técnica molecular (RAPD-PCR) que permite classificar os isolados desta espécie em até nove subtipos. |
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