黏着斑激酶酪氨酸磷酸化在牵拉依赖的细胞形态改变中的作用

Autor: 王连荣, 王菊光, 吴伟康
Jazyk: čínština
Rok vydání: 2002
Předmět:
Zdroj: Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, Vol 23 (2002)
Druh dokumentu: article
ISSN: 1672-3554
Popis: 【目的】探讨黏着斑激酶(FAK)397 和925 位酪氨酸残基(Y397 , Y925)酪氨酸磷酸化在单轴周期性牵拉引起的 细胞形态改变(垂直于牵拉轴方向排列和伸长)中的作用。【方法】用含100 mL/ L 胎牛血清的DMEM 培养大鼠成纤维细胞 3Y1 。利用PCR 法从人的脐静脉内皮细胞获得FAK cDNA 。通过直接点突变, 利用重叠PCR 制成突变的FAK(F397Y, F925Y)。将FAK 突变转染到细胞内, 使细胞遭受牵拉, 牵拉0 min 为对照组, 牵拉5 、10、20 、30、60 min 为牵拉组, 实验重复3 次, 实验数据利用方差分析和多重比较进行分析。然后利用FAKY397 和Y925 磷酸化的特殊抗体进行了免疫印迹实验, 采用 信息分析程序(Mocha , Jandel Scientific)测定免疫印迹的密度, 比较对照组与牵拉组, 检测FAK 酪氨酸磷酸化, 分析细胞形态 改变。【结果】在牵拉反应中, FAKY397 和Y925 的酪氨酸磷酸化水平比对照组明显增高(P
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