E3泛素-蛋白连接酶Parkin介导线粒体自噬参与荷瘤小鼠心肌损伤

Autor: 邓世杰, 李兴会, 蔡卫斌
Jazyk: čínština
Rok vydání: 2022
Předmět:
Zdroj: Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, Vol 43, Pp 181-191 (2022)
Druh dokumentu: article
ISSN: 1672-3554
DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0203
Popis: 目的观察荷瘤状态下小鼠心肌损伤情况,探讨park2基因编码的E3泛素-蛋白连接酶Parkin介导线粒体自噬在荷瘤小鼠心肌损伤中的作用及机制。方法通过PCR和蛋白质免疫印迹筛选和鉴定park2-/-小鼠;通过皮下移植瘤技术构建荷瘤动物模型,采用小动物心脏超声分析小鼠心脏结构与功能,观察心室内径、心室容积、射血分数、缩短分数以及心室壁厚度的变化;采用病理学方法分析小鼠心脏的形态学特征;使用Fluo-3、Rhod-2、DHE-ROS及JC-1探针进行线粒体损伤指标检测;通过qPCR技术分析线粒体生成相关因子tfam,nrf1,线粒体融合相关因子opa1,mfn2,线粒体分裂相关因子fis1,线粒体自噬相关因子park2表达改变;通过Western Blot技术检测关键蛋白LC3 Ⅱ、LC3 Ⅰ、Parkin表达水平。结果心脏超声检测结果显示,B16黑色素瘤荷瘤小鼠心脏功能下降明显(PP=0.032);进一步分析显示荷瘤状态可引起心肌细胞线粒体损伤,并激活线粒体自噬;park2-/-小鼠荷瘤后,其死亡率明显增加(Ppark2-/-小鼠进行上述荧光探针、病理学观察及关键分子检测,结果显示park2-/-小鼠线粒体损伤较WT小鼠严重,线粒体自噬过程受到抑制(P
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