环状RNA circ_0036176结合miR-218-5p发挥抑制心肌纤维化的作用

Autor: 黄智琪, 严钰敏, 郭晶, 郭继深, 朱杰宁, 方咸宏, 徐金东, 单志新
Jazyk: čínština
Rok vydání: 2022
Předmět:
Zdroj: Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, Vol 43, Pp 61-69 (2022)
Druh dokumentu: article
ISSN: 1672-3554
DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0108
Popis: 目的探究环形RNA circ_0036176对心肌纤维化表型的调控作用。方法通过RT-qPCR检测人心肌组织(包括18例器官捐赠健康志愿者和28例心力衰竭患者)中circ_0036176及其宿主基因MYO9A的表达水平。利用血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)处理人心房肌成纤维细胞(HAFs),RT-qPCR检测circ_0036176和MYO9A的表达水平。放线菌素D和RNase R处理,鉴定circ_0036176的典型环状结构。使用circ_0036176腺病毒在HAFs中实现充分过表达,mRNA及蛋白水平检测纤维化相关基团的表达差异。利用双萤光素酶报告基因实验和RNA反义纯化技术(RAP)筛选可与circ_0036176有效结合的miRNA。利用C57BL/6乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)研究miR-218-5p是否介导circ_0036176对心肌纤维化表型的调节作用。结果Circ_0036176在心衰心肌中表达增加( P<0.001),但在Ang-Ⅱ诱导的HAFs纤维化细胞模型中,宿主基因及该circRNA的表达一致下调 ( P<0.01)。放线菌素D和RNase R实验证实circ_0036176具有典型的环形RNA稳定性。在HAFs中充分过表达circ_0036176后,纤维化相关基因表达均有所下降 ( P<0.05)。双萤光素酶报告基因实验与RAP实验证实miR-218-5p与circ_0036176间存在结合作用。mCFs中转染miR-218-5p促进了纤维化相关基团的表达,并可有效抵抗circ_0036176的纤维化抑制作用。结论Circ_0036176在心衰病人的心肌组织中表达上调,并可通过吸附 miR-218-5p的方式来抑制心肌纤维化。
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