The influence of gene therapy on structural damage in case of traumatic brain injury in experiment

Autor: Biloshytsky, V. V., Semenova, V. M., Gridina, N. Ya., Tsyba, L. O., Vasilyeva, I. G., Chopik, N. G.
Jazyk: ruština
Rok vydání: 2009
Předmět:
Zdroj: Український нейрохірургічний журнал; № 1 (2009); 14-20
Украинский нейрохирургический журнал; № 1 (2009); 14-20
Ukrainian Neurosurgical Journal; № 1 (2009); 14-20
ISSN: 1810-3154
2412-8791
Popis: Изучены возможности улучшения исхода черепно-мозговой травмы (ЧМТ) в эксперименте с использованием метода генной терапии, направленной на индукцию синтеза аполипопротеина Е (apoE)3 в ткани травмированного мозга. Тяжелую ЧМТ наносили крысам под общей анестезией путем свободного падения груза массой450 гс высоты1,5 м. Внутрижелудочковую инфузию катионных липосом DOTAP, несущих 25 мкг плазмидного вектора pCMV•SPORT6 с кДНК гена APOE3, выполняли с помощью осмотических помп ALZET. На 10-е сутки после травмы оценивали эффективность трансфекции методом RT-CRР; проводили гистологическое исследование головного мозга. С помощью RT-CRР подтверждена экспрессия гена APOE3 по наличию соответствующей мРНК в образцах ткани головного мозга крыс. Липосомная трансфекция геном APOE3 ткани мозга крыс с ЧМТ обеспечивала протекторное действие на сосудистую систему и паренхиму мозга, предотвращала формирование зон вторичной дезинтеграции в травмированном мозге. Об этом свидетельствовало значительное уменьшение (до следовой) выраженности признаков нарушения проницаемости капилляров и повреждения паренхимы мозга, реактивного отека мозга леченых животных.
Вивчені можливості поліпшення наслідків черепно-мозкової травми (ЧМТ) в експерименті з використанням методу генної терапії, спрямованої на індукцію синтезу аполіпопротеїну Е (apoE)3 у тканині травмованого мозку. Тяжку ЧМТ наносили щурам під загальною анестезією шляхом вільного падіння вантажа масою450 гз висоти1,5 м. Внутрішньошлуночкова інфузія катіонних ліпосом DOTAR, що містили 25 мкг плазмідного вектору pCMV•SPORT6 з кДНК гену АРОЕ3, здійснювали за допомогою осмотичних помп ALZET. На 10-ту добу після травми оцінювали ефективність трансфекції методом RT-CRP; проводили гістологічне дослідження головного мозку. За допомогою RT-CRP підтверджено експресію гену АРОЕ3 за наявністю відповідної мРНК у зразках тканини головного мозку щурів. Ліпосомна трансфекція геном АРОЕ3 тканини мозку щурів з ЧМТ забезпечувала протекторну дію на судинну систему і паренхіму мозку, попереджала формування зон вторинної дезинтеграції у травмованому мозку. Про це свідчило значне зменшення (до слідової) вираженості ознак порушення проникності капілярів і пошкодження паренхіми мозку, реактивного набряку мозку лікованих тварин.
Possibilities of improving traumatic brain injury (TBI) outcomes using gene therapy directed at apoE3 synthesis induction in damaged brain tissue were studied in an experimental setting. A severe TBI was inflicted in rats under general anesthesia by a450 gweight falling free from a height of1.5 m. A mixture of DOTAP liposome and 25 µg of plasmid vector pCMV•SPORT6 with cDNA of APOE3 gene was infused into ventricles using ALZET pumps. On the 10th day following the TBI the transfection effectiveness was evaluated using RT-PCR; histological examination of the brain tissue was done. Applying the RT-PCR method corroborated the expression of APOE3 gene with corresponding mRNA presence in the samples of brain tissue. Liposome transfection of the rats’ damaged brain by APOE3 protected the vascular system and brain parenchyma, and prevented the formation of secondary disintegration zones in the damaged brain. It was verified by a considerable reduction of signs of capillary permeability disturbance (almost to marks) and brain parenchyma damage, as well as reactive brain edema in animals under treatment.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: