PECTOBACTERIUM CAROTOVORUM SUBSP.CAROTOVORUM LOW-MOLECULAR-WEIGHT CAROTOVORICINS

Jazyk: ukrajinština
Rok vydání: 2017
Předmět:
Zdroj: Microbiology&Biotechnology; № 3(39) (2017); 75-83
Микробиология и биотехнология; № 3(39) (2017); 75-83
Мікробіологія і біотехнологія; № 3(39) (2017); 75-83
ISSN: 2076-0558
2307-4663
Popis: Мета. Вивчення властивостей низькомолекулярних бактеріоцинів Pectobacterium carotоvorum subsp. carotovorum Б4. Методи. Низькомолекулярні каротоворицини отримували індукцією налідиксовою кислотою із 13 штамів Pectobacterium carotovorum, концентрували висолюванням сульфатом амонію, розділяли ультрацентрифугуванням, додаткову очистку проводили на ДЕАЕ-сефарозі. Активність отриманих каротоворицинів перевіряли на Pectobacterium carotovorum 66А, а також Escherichia coli BЕ, K12 і C600. Для досліджуваних речовин визначали молекулярну масу та перевіряли серологічну спорідненість із піоцинами S1-S5 підтипу. Результати. Отримані низькомолекулярні каротоворицини відрізнялися за рівнем та спектром кілерної активності відносно індикаторних штамів, проте найвищу активність проявляли щодо E. coli BЕ. Було показано, що до складу сумарної фракції каротоворицинів штаму Pectobacterium carotovorum subsp. сarotovorum Б4 входять білки 30, 38, 42 і 54 кДа. При подальшій очистці було виділено єдиний активний компонент з молекулярною масою 54 кДа, який впливав лише на E. coli BЕ. Перевірка гомології досліджуваного каротоворицину із піоцинами S1-S5 підтипів показала відсутність серологічної спорідненості. Висновки. Досліджуваний бактеріоцин Pectobacterium carotovorum subsp. сarotovorum Б4 з молекулярною масою 54 кДа за виявленими властивостями не відповідає жодному із описаних на даний момент бактеріоцинів і може бути новим представником низькомолекулярних каротоворицинів. Відсутність серологічної спорідненості із низькомолекулярними піоцинами S підтипу і активність виключно щодо штаму E. coli BЕ можуть вказувати на гомологію даного білка із коліцинами.
Цель. Изучение свойств низкомолекулярных бактериоцинов Pectobacterium carotоvorum subsp. carotovorum Б4. Методы. Низкомолекулярные каротоворицины были получены индукцией налидиксовой кислотой из 13 штаммов Pectobacterium carotovorum, сконцентрированы высаливанием сульфатом аммония, разделены ультрацентрифугированием и дополнительно очищены на ДЕАЕ-сефарозе. Активность полученных каротоворицинов проверяли на Pectobacterium carotovorum 66А, а также Escherichia coli BЕ, K12 и C600. У исследуемых веществ определяли молекулярную массу и наличие серологического родства с пиоцинами S1-S5 подтипов. Результаты. Полученные низкомолекулярные каротоворицины отличались по уровню и спектру киллерной активности, однако наивысшую активность проявляли по отношению к E. coli BЕ. Суммарная фракция каротоворицинов штамма Pectobacterium carotovorum subsp. сarotovorum Б4 представлена белками 30, 38, 42 и 54 кДа. В результате дальнейшей очистки был выделен единственный активный компонент с молекулярной массой 54 кДа, который обладал узким спектром киллерной активности и влиял только на E. coli BЕ. При изучении гомологии данного каротоворицина с пиоцинами S1-S5 подтипов показано отсутствие серологического родства. Выводы. Согласно полученным результатам, исследованный бактериоцин Pectobacterium carotovorum subsp. сarotovorum Б4 с молекулярной массой 54 кДа отличается от изученных на данный момент бактериоцинов и может быть новым представителем низкомолекулярных каротоворицинов. Отсутствие серологического родства с низкомолекулярными пиоцинами S подтипа и активность исключительно по отношению к штамму E. coli BЕ могут свидетельствовать о гомологии данного белка с колицинами.
The aim was studying of properties of low-molecular-weight bacteriocins of Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum B4. Methods. Low-molecularweight bacteriocins were obtained from 13 Pectobacterium carotovorum strains by nalidixic acid induction, concentrated by salting-out with ammonium sulphate, separated by ultracentrifugation, additional purification was carried out at DEAE-sepharose. The activity of obtained bacteriocins was tested against Pectobacterium carotovorum 66А, as well as Escherichia coli BЕ, K12 and C600. Molecular mass was determined and serologic relationships with pyocins of S1-S5-type were checked for the researched substances. Results. The obtained lowmolecular-weight carotovoricins differed in level and spectrum of killer activity against indicator strains, but the highest activity was against Escherichia coli BЕ. It was shown that proteins of 30, 38, 42 and 54 kDa were the parts of summary fraction of Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum B4 carotovoricins. After further purification a single active component with molecular mass of 54 kDa was isolated. This protein was characterized by narrow pectrum of killer activity and influenced only on Escherichia coli BЕ. Checking of homology of the researched carotovoricin and pyocins of S1-S5-type indicated the absence of serologic relationships. Conclusions. According to revealed properties, Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum B4 carotovoricin with molecular mass of 54 kDa doesn’t conform to the characteristics of any described bacteriocins and can be a member of new low-molecular-weight carotovoricins. The absence of serologic relationships with low-molecular-weight pyocins of S-type and activity against only Escherichia coli BЕ can indicate the homology of this protein and colicins.
Databáze: OpenAIRE