Electroporation of mice zygotes with dual guide RNA/Cas9 complexes for simple and efficient cloning-free genome editing
| Autor: | Teixeira, Marie, Py, Bénédicte F., Bosc, Christophe, Laubreton, Daphné, Moutin, Marie-Jo, Marvel, Jacqueline, Flamant, Frédéric, Markossian, Suzy |
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| Přispěvatelé: | École normale supérieure - Lyon (ENS Lyon), Grenoble Institut des Neurosciences (GIN), Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-CHU Grenoble-Université Joseph Fourier - Grenoble 1 (UJF), Institut de Génomique Fonctionnelle de Lyon (IGFL), École normale supérieure - Lyon (ENS Lyon)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Université Claude Bernard Lyon 1 (UCBL), Université de Lyon-Université de Lyon-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université Joseph Fourier - Grenoble 1 (UJF)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM), Moutin, Marie-Jo, [GIN] Grenoble Institut des Neurosciences (GIN), Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Université Grenoble Alpes [2016-2019] (UGA [2016-2019]), École normale supérieure de Lyon (ENS de Lyon), École normale supérieure de Lyon (ENS de Lyon)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Université Claude Bernard Lyon 1 (UCBL) |
| Jazyk: | angličtina |
| Rok vydání: | 2018 |
| Předmět: | |
| Zdroj: | Scientific Reports Scientific Reports, Nature Publishing Group, 2018, 8 (1), ⟨10.1038/s41598-017-18826-5⟩ Scientific Reports, Vol 8, Iss 1, Pp 1-9 (2018) Scientific Reports, 2018, 8 (1), ⟨10.1038/s41598-017-18826-5⟩ Scientific Reports 1 (8), . (2018) |
| ISSN: | 2045-2322 |
| DOI: | 10.1038/s41598-017-18826-5⟩ |
| Popis: | In this report, we present an improved protocol for CRISPR/Cas9 genome editing in mice. The procedure consists in the electroporation of intact mouse zygotes with ribonucleoprotein complexes prepared in vitro from recombinant Cas9 nuclease and synthetic dual guide RNA. This simple cloning-free method proves to be extremely efficient for the generation of indels and small deletions by non-homologous end joining, and for the generation of specific point mutations by homology-directed repair. The procedure, which avoids DNA construction, in vitro transcription and oocyte microinjection, greatly simplifies genome editing in mice. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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