Avian reovirus replication in mononuclear phagocytes in chicken footpad and spleen after footpad inoculation
| Autor: | Yu San, Chen, Pin Chun, Shen, Bor Sheu, Su, Tsung Ching, Liu, Cheng Chung, Lin, Long Huw, Lee |
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| Rok vydání: | 2014 |
| Předmět: |
Gene Expression Regulation
Viral Foot Orthoreovirus Avian virus diseases Membrane Proteins Virus Replication Immunohistochemistry Article Reoviridae Infections Specific Pathogen-Free Organisms Animals Viral Regulatory and Accessory Proteins Chickens Mononuclear Phagocyte System Poultry Diseases Spleen |
| Zdroj: | Canadian journal of veterinary research = Revue canadienne de recherche veterinaire. 79(2) |
| ISSN: | 1928-9022 |
| Popis: | Circulating monocytes and tissue macrophages were suggested to be susceptible to avian reovirus (ARV) infection. To determine if ARV infects and replicates in mononuclear phagocytes (KUL01-positive cells), we infected 3-day-old specific-pathogen-free chickens with ARV strain 2408 by inoculation of the left footpad. The left footpads and spleens were collected for analysis at 1.5 and 2.5 d after inoculation. Replication of ARV in the footpad and spleen was demonstrated by detection of the viral protein σNS using immunohistochemical testing and viral S1 RNA expression by real-time quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Furthermore, immunofluorescent double-staining assay of cytocentrifuged cells and cryosections of the footpad and spleen for the viral protein σNS and the surface marker recognized by monoclonal antibody (MAb) KUL01 indicated that KUL01-positive cells costained with MAb H1E1, which recognizes ARV protein σNS. In addition, more ARV S1 RNA was measured by qPCR in the KUL01-positive cell samples prepared from the footpad or spleen 1.5 d after inoculation compared with non-KUL01-positive cell samples. The amounts of ARV S1 RNA in the spleen were significantly lower (P0.05) than the amounts in the footpad 1.5 d after inoculation. The results suggest that ARV infects mononuclear phagocytes and then replicates within these cells before migrating to the spleen, where it infects and replicates in KUL01-positive cells.Il a été suggéré que les monocytes circulants et les macrophages tissulaires étaient sensibles à une infection par le reovirus aviaire (ARV). Afin de déterminer si l’ARV infecte et se réplique dans les phagocytes mononucléaires (cellules KUL01-positives), nous avons infecté des poussins exempts d’agents pathogènes spécifiques âgés de 3 j avec la souche 2408 d’ARV par inoculation dans le coussinet plantaire gauche. Les coussinets plantaires et les rates furent prélevés pour analyse aux jours 1,5 et 2,5 suivant l’inoculation. La réplication d’ARV dans le coussinet plantaire et la rate fut démontrée par détection de la protéine virale σNS par épreuve immunohistochimique et l’expression d’ARN S1 viral par réaction d’amplification en chaîne par la polymérase en temps réel (qPCR). De plus, l’épreuve d’immunofluorescence par double coloration de cellules cytocentrifugées et de coupes congelées du coussinet plantaire et de la rate pour la protéine virale σNS et le marqueur de surface reconnu par l’anticorps monoclonal (AcMo) KUL01 indiquait que les cellules positives pour KUL01se co-coloraient avec l’AcMo H1E1, qui reconnait la protéine σNS de l’ARV. Également, plus d’ARN S1 d’ARV était mesuré par qPCR dans les échantillons de cellules KUL01 positives préparés à partir de coussinets plantaires ou de rates 1,5 j après l’inoculation comparativement à des échantillons de cellules KUL01 négatives. Les quantités d’ARN S1 d’ARV dans la rate étaient significativement plus basses ( |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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