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Diese Arbeit beschäftigt sich mit dem Aufkommen von Antikörpern gegen nodale und paranodale Strukturen in Patient*innen mit chronisch inflammatorischer demyelinisierender Polyneuropathie (CIDP). Betroffene leiden unter sensorischen Beeinträchtigungen, Muskelschwäche und neuropathischen Schmerzen. Im paranodalen Bereich des Ranvier-Schnürrings auf Axonen befindet sich ein Proteinkomplex, welcher aus den drei Proteinen, Neurofascin 155 (NF155), Contactin 1 (CNTN1) und Contactin-assoziiertem Protein 1 (CASPR1) besteht. Diese stellen die Verbindung zwischen Myelinscheiden und Axon dar und ermöglichen eine saltatorische Nervenweiterleitung. Sind Antikörper gegen diese Proteine vorhanden, weisen Patient*innen eine gestörte Nervenleitung auf. In der vorliegenden Arbeit stehen Autoantikörper gegen das CASPR1 im Fokus. Eine CASPR1-assoziierte CIDP äußert sich durch bestimmte klinische Charakteristika, wie einen akuten Verlauf und ein mangelhaftes Ansprechen auf CIDP-Standardtherapien aber erfolgreiches Ansprechen auf Rituximab. Da es sich klinisch unterschiedlich zur klassischen CIDP präsentiert, wurde von der EAN (European Academy of Neurology) und PNS (Peripheral Nerve Society) vorgeschlagen, für diese Gruppe eine neue Kategorie, die „Autoimmun-Nodopathien“ einzuführen. Bislang erfolgte der Nachweis dieser Antikörper in der Abteilung für Neuropathologie und Neurochemie der Medizinischen Universität Wien mittels Tissue-based Assay (TBA) und Cell-based Assay (CBA). In dieser Arbeit konnte ein in-house CASPR1-ELISA etabliert werden, der dem CBA überlegen ist. Für diese Forschungsarbeit wurden n=60 Seren sowohl mit dem TBA, CBA und ELISA auf CASPR1-Antikörper untersucht. Von diesen Serumproben wurden zuvor mit einem ELISA aus einem ausländischen Speziallabor (Prof. L. Querol, Barcelona) zehn Proben als negativ und zehn Proben als positiv bestätigt. Der TBA erreichte in dieser Forschungsarbeit eine Sensitivität von 100% und eine Spezifität von 40%. Der CBA erreichte eine Sensitivität von 50% und eine Spezifität von 80%. Der ELISA erreichte eine Sensitivität von 80% und eine Spezifität von 100%. Aufgrund der wenigen verfügbaren Positiv-kontrollen war der Stichprobenumfang für das Erreichen eines signifikanten Ergebnisses in der Validierung zu klein. Der ELISA wird parallel zum Probenversandt nach Barcelona durchgeführt werden und sobald ein ausreichender Stichprobenumfang für die Validierung erreicht ist routinediagnostisch eingeführt werden. This thesis deals with the appearance of autoantibodies against nodal and paranodal structures in patients with chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy (CIDP). Patients with CIDP suffer from sensory deficiency, muscle weakness and neuropathic pain. The paranodal compartment of the Node of Ranvier contains a complex of three proteins: Neurofascin 155 (NF155), Contactin 1 (CNTN1) and Contactin-associated protein 1 (CASPR1). These bind the myelin sheathes to the axon and ensure a saltatory nerve conduction. Patients with antibodies against these proteins have a disrupted nerve conduction. The present work is focused on CASPR1-antibodies. A CIDP associated with CASPR1-antibodies shows distinct clinical characteristics, for example an often acute onset and a poor response to CIDP standard therapies but a sufficient response to rituximab. Because its clinical presentation differs from classic CIDP, EAN (European Academy of Neurology) and PNS (Peripheral Nerve Society) have suggested to establish a new category called “autoimmune-nodopathies”. Testing for CASPR1-autoantibodies is currently performed at the Division of Neuropathology and Neurochemistry of the Medical University of Vienna with a tissue-based assay (TBA) and a cell-based assay (CBA). In this research work an in-house CASPR1-ELISA was established, which is superior to the other methods. In this study n=60 sera were analyzed for CASPR1-antibodies with TBA, CBA and ELISA. Out of these samples, ten were previously confirmed as positive and ten confirmed as negative with the ELISA of an external laboratory (Prof. L. Querol, Barcelona). The TBA reached a sensitivity of 100% and a specificity of 40%. The CBA reached a sensitivity of 50% and a specificity of 80%. The ELISA reached a sensitivity of 80% and a specificity of 100%. Due to the insufficient number of positive controls a significant result for the validation could not be achieved. The ELISA will be conducted simultaneously with the sample shipment to Barcelona. As soon as we have a sufficient number of samples for the validation the ELISA will be established as part of the routine diagnostics. |
