Untersuchung des Taurin-Metabolismus in naiven CD8+ T-Zellen

Autor: Wurmbauer, Mara
Jazyk: němčina
Rok vydání: 2023
Předmět:
Popis: Die konditionell essenzielle Aminosulfonsäure Taurin ist Bestandteil vieler Arten von Zellen und Gewebetypen. In T-Zellen macht Taurin fast die Hälfte des Zellvolumens aus. Trotz des hohen Vorkommens der proteinogenen Aminosulfonsäure, ist die Funktion in vielerlei Zellen bis zum heutigen Zeitpunkt nicht geklärt. Im Rahmen von T-Zellen wird eine Funktion als Osmoregulator vermutet. Taurin kann über zwei Synthesewege intrazellulär hergestellt werden. Der erste Weg ist über das Enzym Cystein Dioxygenase (CDO), welche die stufenweise Oxidation und Decarboxylierung des Ausgangprodukts Cystein synthetisiert. Eine weitere Möglichkeit stellt die Oxidation von Cysteamin durch die Cysteamin Dioxygenase (ADO) dar. Zusätzlich hierzu kann Taurin durch einen extrazellulären Transporter TauT aufgenommen werden. Mittels einer RT-qPCR wurde quantifiziert welcher Syntheseweg in naiven CD8+ T-Zellen bevorzugt wird. Es stellt sich heraus, dass T-Zellen die Expression des ADO-Enzyms bevorzugen. Anschließend wurde die Funktionalität von CD8+ T-Zellen nach einem durchgeführten ADO-Knockouts überprüft. Einerseits wurde die Proliferation gemessen, wobei sich zeigt, dass verschiedene Spender unterschiedlich reagieren. Die Proliferation nimmt dementsprechend durch das Fehlen von Taurin entweder ab oder zu. Dieses Verhalten spiegelt sich in den weiteren, mittels Durchflusszytometrie, durchgeführten Analysen der Oberflächenmarker CD98hc, CD25, CD71, ICOS, TIGIT und PD1 wider. Ebenfalls nimmt das intrazelluläre Granzyme B, welche essenziell für die zytotoxische Funktionalität ist, in unterschiedlichen Spendern ab oder zu. Es kann darauf geschlossen werden, dass Taurin eine wichtige Rolle in der T-Zellaktivierung und der Proliferation spielt, wobei sich die positiven oder inhibitorischen Auswirkungen auf die Funktionalität in verschiedenen Spendern unterschiedet. The conditionally essential amino sulfonic acid taurine is a component of many types of cells and tissues. In T cells, taurine accounts for almost half of the cell volume. Despite the high occurrence of the proteinogenic amino sulfonic acid, its function in many types of cells has not been clarified to this day. In the context of T cells, a function as an osmoregulator is suspected. Taurine can be produced intracellularly via two synthetic pathways. The first pathway is via the enzyme cysteine dioxygenase (CDO), which synthesizes the stepwise oxidation and decarboxylation of the starting product cysteine. The oxidation of cysteamine by cysteamine dioxygenase (ADO) represents another possibility. In addition to this, taurine can be taken up by an extracellular transporter TauT. RT-qPCR was used to quantify which synthetic pathway is preferred in naive CD8+ T cells. It turns out that T cells prefer the expression of the ADO enzyme. Subsequently, the functionality of CD8+ T cells after an ADO knockout was examined. On the one hand, proliferation was measured, showing that different donors respond differently. Accordingly, proliferation either decreases or increases in the absence of taurine. This behavior is reflected in the further analyses of the surface markers CD98hc, CD25, CD71, ICOS, TIGIT and PD1 performed by flow cytometry. Likewise, intracellular granzyme B, which is essential for cytotoxic functionality, decreases or increases in different donors. It can be concluded that taurine plays an important role in T cell activation and proliferation, although the positive or inhibitory effects on functionality differed in different donors.
Databáze: OpenAIRE