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Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS) ist eine schwere Krankheit, welche durch das SARS-CoV-2 Virus hervorgerufen wird. Durch die Interaktion mit Zellrezeptoren spielt das Spike Protein eine wichtige Rolle bei der Infektion von Wirtszellen. Das S-Protein zeigt eine ausreichende Immunogenität, um die körpereigene Produktion von spezifischen Antikörpern anzuregen Das Ziel dieser Bachelorarbeit ist es innerhalb einer Gruppe eine Produktionsanlage zu designen, mit welcher SARS-CoV-2 Spike Protein in HEK 293 Zellen produziert wird, um durch aufeinander folgende Reinigungsschritte aus der Fermentationsbrühe das SARS-CoV-2 Spike Protein zu gewinnen. Dieser Teil der Arbeit beschäftigt sich mit der primären Klärung der Zellbrühe nach der Fermentation. Es wurde mit der Erstellung eines R&I Schemas begonnen welches gekühlte Lagertanks, eine Tellerzentrifuge und einen Tangentialfilter beinhaltet. Die Anforderungen an einen Lagertank und die Tellerzentrifuge wurden in einem Lastenheft spezifiziert. Für die Klärung der Zellbrühe mit der Tellerzentrifuge und für die Reinigung der Tellerzentrifuge wurde je eine SOP geschrieben. Um den Zentrifugationsvorgang zu dokumentieren, wurde auch ein Master Batch Record erstellt. Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS) is a serious illness caused by the SARS-CoV-2 virus. By interacting with cell receptors, the spike protein plays an important role in virus - host cell interactions. The S protein causes enough immunogenicity to stimulate the body's own production of specific antibodies. The aim of this bachelor thesis is to conceive, as a group, a production facility to produce SARS-CoV-2 spike protein in HEK 293 cells and by performing consecutive purification steps to recover the SARS-CoV-2 spike protein from the fermentation broth. This part of the bachelor thesis describes the primary clarification after the fermentation. At first a P&ID scheme was designed which includes two chilled tanks, a disc stack centrifuge and a tangential flow filtration module. The tanks and the disc stack centrifuge were specified in user requirement specifications. The clarification of the cell broth and the cleaning in place of the disc stack centrifuge were described in standard operating procedures. For the documentation of the cell broth clarification a master batch record was prepared. |
