| Popis: |
İnsan göbek kordon kanı (KK) kaynaklı Hematopoietik kök hücre (HKH)'lerin klinik uygulama için yeterli niteliklere sahip olup olmadığını gösteren standart yöntemler mevcuttur. Akım sitometri yöntemi ile CD34+ hücre mutlak sayısı KK ünitesi seçimindeki HLA uyumundan sonraki seçim kriteridir. Fenotipik bir belirleyici olan CD34+ hücre sayısı kadar, bu hücre fraksiyonların ve işlevselliğinin ortaya konması, uzun dönem ve kısa dönem hücreleri tanımlamak için de kullanılmaktadır. Kök hücre dondurarak saklama sırasında ve eriterek çözme sonrası HKH kalite ve sayısının belirlenmesi de önemli bir gereksinimdir. KK HKH içeriğini belirlemeye yönelik işlevsel bir yöntem olan ex vivo koloni oluşturma (CFU-GM) testleri bu gereksinimleri karşılamaya yönelik olarak geliştirilmiştir. Hücre fraksiyonlarının işlevsel niteliklerini hızlı bir şekilde belirlemek için aldehit dehidrogenaz (ALDH) aktivite tayini yöntemi geliştirilmiştir. Bu tez çalışması ile KK hücrelerinde toplanmayı takiben kabul kriterlerini sağlayan taze örneklerde ve dondurup çözülme sonrası örneklerde çalışılan CFU-GM kapasitesi, akım sitometrik CD34+ ve ALDH aktivitesi arasındaki ilişkinin analizi hedeflenmiştir. Araştırmaya 35 KK örneği dahil edilmiş, tüm örneklerde bu üç parametre analiz edilmiştir. Örneklerin 30'u eritrosit ve plazma ayrıştırma işlemi sonrası; 5'i araştırmaya ayrılmış -196°C'de saklanma sonrası çözüldükten sonra çalışmaya dahil edilmiştir. Taze örneklerin ortalama hücre içeriği toplam çekirdekli hücre (TNC) (93,27 ± 30,1 x106/Ünite), CD34+ hücre (3,85 ± 2,55 x106/Ünite), ALDH pozitif (ALDH+) hücre (3,14 ± 2,55 x106/Ünite), CFU-GM sayısı (13,2 ± 9,81 x105/Ünite), CFU-GEMM sayısı (19,3 ± 13,65 x105/Ünite) ve dondurulup çözülmüş örneklerde, TNC (71,76 ± 29,77 x106/Ünite), CD34+ hücre (5,44 ± 5,08 x106/Ünite), ALDH+ hücre (2,9 ± 2,82 x106/Ünite) ,CFU-GM sayısı (6,18 ± 3,44 x106/Ünite) ve CFU-GEMM sayısı (4,57 ± 3,22 x106/Ünite) aktiveteleri analiz edilmiştir. Taze örneklerde CD34 ile CFU-GM (r=0,722 p |
