| Popis: |
Toxoplasma gondii medikal ve veteriner önemi yanında hücre biyolojisi ve moleküler çalısmalara model olması sebebiyle üzerinde en çok çalısma yapılmıs parazitlerden biri olarak kabul edilmektedir. Dünyada serolojik testlerde antijen olarak genelde fare veya ratlarda üretilen takizoitler kullanılmaktadır. Hayvanlarda T. gondii takizoitlerinin üretilmesi sırasında yasanan maliyet ve etik sorunlar hücre kültürünün kullanılmasıyla en aza inmektedir. Hücre kültüründe T. gondii üretilirken takizoit miktarının ve canlılıgının yüksek seviyede olması ve konak hücre kontaminasyonunun serolojik testlerin sonucunu etkilememesi amaçlanmaktadır. Bununla birlikte hücre kültüründe sürekli üretim sırasında gerçeklesen gen ekspresyon degisiklikleri T. gondii suslarına en uygun kültür ortamının bulunmasını gerektirmektedir. Bu çalısmada canlılık oranı yüksek ve bol miktarda T. gondii RH Ankara susu takizoiti elde ederken, konak hücre kontaminasyonunun en aza indirgeyecek kültür ortamı, HeLa/takizoit oranı 1/8 olan ve iki gün aralıklarla gerçeklestirilen pasajlamalarda olusturulmustur. Elde edilen antijenlerin ELISA, IFAT ve Western blot testlerinde kullanılması sonucunda fare kaynaklı antijene duyarlılık ve özgüllügü yanında kalitatif açıdan en uyumlu antijenin birinci pasajdan elde edildigi belirlenmistir. Sonuç olarak serolojik testler için HeLa hücre kültüründe üretilen antijenler ile hazırlanan testlerin hastalıgı tanımada etkin olarak kullanılabilecegi ve T. gondii RH Ankara uygun kriyopreservasyonu ile hayvan kullanımının azaltılabilecegi sonucuna varılmıstır. |
