| Popis: |
Reprogramiranje i proširenje genetskog koda može se postići prenamjenom već postojećih kodona ili proširenjem uobičajenog tripletnog genetičkog koda na kvadruplete čime se omogućuje ugradnja nekanonskih aminokiselina u polipetidni lanac. Da bi ugradnja nekanonskih aminokiselina bila uspješna potrebno je unaprijediti ribosome, aktivna vezna mjesta ribosoma, elongacijske faktore, tRNA, aminoacil-tRNA-sintetaze (aaRS) te druge faktore koji su potrebni u sintezi proteina. Tako su stvoreni ortogonalni ribosomi s modifikacijama koje omogućuju stvaranje 16S rRNA/mRNA ortogonalnog para, ortogonalni ribosomi koji ugrađuju nekanonske aminokiseline na mjesto UAG (amber) stop kodona te oni ribosomi koji umjesto tripleta mogu dekodirati kvadruplete. Uloga enzima aminoacil-tRNA-sintetaze je vezanje aminokiseline na odgovarajuću tRNA pri čemu troši energiju u obliku ATP-a (adenozin trifosfata). Modifikacije aminoacil-tRNA-sintetaza bitne su jer imaju utjecaj na točnost translacije. Razvijene su tako da čine ortogonalni par sastavljen od aminoacil-tRNA-sintetaze i tRNA. Navedeni ortogonalni par mora biti specifičan, odnosno ortogonalne sintetaze trebaju aminoacilirati samo pripadne tRNA, a ortogonalna tRNA mora biti inertna na endogene aminoacil-tRNA-sintetaze. |
