Quantification of serum M-protein by immunosubstraction method

Autor: Šegulja, Dragana
Přispěvatelé: Matišić, Danica, Barišić, Karmela
Jazyk: chorvatština
Rok vydání: 2023
Předmět:
Popis: Prisutnost M-proteina u serumu karakterizira stanje monoklonske gamapatije. Koncentracija M-proteina izravno korelira s veličinom tumorske mase, osim u vrlo rijetkim slučajevima nesekrecijske bolesti. Detekcija, tipizacija i kvantifikacija M-proteina nužne su za postavljanje dijagnoze, procjenu rizika progresije i praćenje uspješnosti terapije. Ograničenja postojećih metoda kvantifikacije serumskoga M-proteina (denzitometrijska i imunokemijska) razlog su kontinuiranih istraživačkih napora u osmišljavanju novih postupaka koji bi unaprijedili dijagnostiku i praćenje kliničkoga stanja bolesnika s monoklonskom gamapatijom. Cilj je ovoga istraživanja bio razviti i evaluirati osmišljeni računski postupak za kvantifikaciju serumskoga M-proteina primjenom laboratorijskih rezultata kvalitativne metode imunosuptrakcije. Istraživanje je obuhvatilo 133 uzorka bolesnika s monoklonskom gamapatijom klinički praćenih u Kliničkom bolničkom centru Zagreb. U svim je uzorcima provedena elektroforeza serumskih proteina, imunofiksacija i imunosuptrakcija te određena koncentracija ukupnih proteina i pojedinih razreda imunoglobulina G, A i M. Amplituda vrška M-proteina nativnoga uzorka i globulinske krivulje nakon imunoprecipitacije prepoznate su kao ključni parametri u laboratorijskim rezultatima imunosuptrakcije. Podatci o amplitudi krivulja su, uz koncentraciju ukupnih proteina, razreda imunoglobulina uključenoga u sintezu M-proteina i globulina, poslužili kao temelj osmišljenih računskih modela. Utvrđena je vrlo dobra povezanost deriviranih varijabli AD1nIg, D1Ig, D2Ig i D1nIg temeljenih na podacima iz imunosuptrakcijskog elferograma s rezultatima uspoređivanih metoda. Podatci iz imunosuptrakcijskog elferograma o albuminskoj frakciji nisu pridonijeli jačini povezanosti rezultata deriviranih varijabli s rezultatima postojećih metoda. Dokazana je veća preciznost određivanja koncentracije M-proteina primjenom deriviranih varijabli u odnosu na denzitometrijsku metodu i nije ovisila o koncentraciji, prisutnosti poliklonske pozadine niti migracijskom položaju M-proteina. U ovom je radu istražena i opisana mogućnost umjeravanja rezultata imunosuptrakcije. Najusporediviji rezultati s postojećim metodama dobiveni su s rezultatima derivirane varijable D1Ig uz najbolje rezultate procjene preciznosti i točnosti. Dobiveni rezultati upućuju na zaključak da su u računskim modelima za kvantifikaciju M-proteina amplitude krivulja na mjestu vrška M-proteina u imunosuptrakcijskom elferogramu objektivan i vrijedan mjerljivi parametar neovisan o prisutnosti pozadine. Evaluacijom deriviranih varijabli pokazano je da je njihovom primjenom moguće unaprijediti dijagnostiku i praćenje kliničkoga stanja bolesnika s monoklonskom gamapatijom. The presence of M-protein in serum characterizes the state of monoclonal gammopathy. M-protein concentration directly correlates with tumor mass size, except in very rare cases of the nonsecretory disease. Detection, typing, and quantification of M-protein are necessary for diagnosis, assessment of the risk of progression, and monitoring the therapy efficiency. The shortcomings of existing methods for M-protein quantification (densitometric and immunochemical) encourage ongoing research efforts to develop novel procedures that would improve the management of patients with monoclonal gammopathy. This study aimed to develop and evaluate a computational procedure for quantifying serum M-protein using laboratory results of a qualitative immunosubtraction method. The study included 133 samples of patients with monoclonal gammopathy treated at the University Hospital Center Zagreb. Serum protein electrophoresis, immunofixation, and immunosubtraction were performed in all samples, and the concentrations of total protein and of individual immunoglobulin classes G, A, and M were determined. The amplitude of the M-protein spike of the native serum and the globulin curve after immunoprecipitation were recognized as key parameters in the laboratory results of immunosubtraction. Amplitude data, along with the concentrations of total protein, immunoglobulin class involved in M-protein synthesis and globulins represent the basis of explored derived models. A very strong correlation was found between the derived variables AD1nIg, D1Ig, D2Ig, and D1nIg based on data from the immunosubtraction elpherogram with the results of the compared methods. Data on the albumin fraction, generated from immunosubtraction elpherogram, did not improve the correlation. Higher precision of derived variables was demonstrated than in the densitometric method and it was unaffected by concentration, background presence, or migration pattern of M-protein. In this research, the concept of immunosubtraction result normalisation has been described and studied. The most comparable results to both examined methods were obtained with the results of the derived variable D1Ig, with the best precision and accuracy testing results. The findings of this study imply that the change in amplitude of the curves at the M-protein spike position in immunosubtraction elpherogram is an objective, backgroundindependent, measurable, and relevant parameter in M-protein quantification by derived variables. The evaluation of the derived variables showed that their implementation could improve diagnostics and follow-up of patients with monoclonal gammopathy.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: