| Popis: |
Cilj ovog rada bio je klonirati gene ATR1, FLR1, YAP1 i GSH1 za koje je poznato da povećavaju otpornost kvasca na različite inhibitore rasta i fermentacije. Stoga su navedeni geni umnoženi lančanom reakcijom polimerazom iz soja kvasca Saccharomyces cerevisiae UWOPS87-2421 koji je otporniji na inhibitore rasta od laboratorijskih sojeva. Produkti lančane reakcije polimerazom ligirani su s odgovarajućim, prethodno lineariziranim plazmidima (pSP-G2 i pSP-G2-AC) te su ligacijske smjese korištene za transformaciju bakterije Escherichia coli. Iz transformiranih bakterija izolirani su plazmidi te je restrikcijskom analizom dokazano da su od četiri navedena gena uspješno klonirani geni ATR1, YAP1 i GSH1. The aim of this paper was to clone genes ATR1, FLR1, YAP1 and GSH1. These genes are already known to increase the resistance of yeast Saccharomyces cerevisiae to different growth and fermentation inhibitors. Genes ATR1, FLR1, YAP1 and GSH1 were amplified by PCR from strain UWOPS87-2421 which shows higher tolerance to the inhibitors than laboratory strains. PCR products were ligated with corresponding, previously linearized plasmids (pSP-G2 and pSP-G2-AC) and ligation mixture was used to transform bacteria Escherichia coli. Restriction analysis of plasmids isolated from transformed bacteria showed that ATR1, YAP1 and GSH1 genes were successfully cloned. |
