Photoimmunoinactivation of bovine alphaherpesvirus 1 in semen
| Autor: | Oliveira, Taise Maria dos Anjos |
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| Přispěvatelé: | Souza, Guilherme Rocha Lino de, Gonçalves, Pablo José, Cunha, Paulo Henrique Jorge da, Borsanelli, Ana Carolina, Almeida, Luciane Madureira de, Souza, Márcio Adriano Rodrigues, Meirinhos, Maria Lúcia Gambarini |
| Jazyk: | portugalština |
| Rok vydání: | 2020 |
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| Zdroj: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG Universidade Federal de Goiás (UFG) instacron:UFG |
| Popis: | O Alfaherpesvírus bovino I (BoHV-1) representa um risco potencial de infecção aos rebanhos por todo o mundo, ocasionando inúmeras perdas econômicas relacionadas tanto com a infecção respiratória quanto a reprodutiva. Na esfera reprodutiva, temos o sêmen como uma importante fonte de disseminação do vírus para o rebanho. Dessa forma, visando a desinfecção de sêmen, foi utilizada a inativação fotodinâmica (PDI) como uma alternativa viável aos tratamentos convencionais. Esta técnica envolve a combinação de um composto fotossensibilizador (PS), oxigênio molecular e luz, tendo como resultado a geração de espécies reativas do oxigênio, capazes de ocasionar a morte celular por apoptose, necrose ou autofagia. Diversos compostos fotossensibilizantes estão disponíveis no mercado, contudo, novos compostos são desenvolvidos com o intuito de melhorar a eficácia frente a alvos biológicos específicos. Assim, este estudo avaliou a eficácia de porfirinas ligadas ao paládio, porfirinas sulfonadas halogenadas, hematoporfirinas (HP) e zinco tetracarboxi-ftalocianina (ZnPc), na inativação fotodinâmica in vitro BoHV-1. Bem como, o desenvolvimento de imunoconjugados, compostos pela conjugação direta entre imunoglobulinas (IgY anti-BoHV-1) e fotossensibilizadores (ZnPc e HP) para a PDI em sêmen. Entre os fotossensibilizadores testados, as porfirinas de paládio (dppf e dppe) a 10 μM apresentaram melhores resultados in vitro, inativando o vírus completamente com até cinco minutos de irradiação. Os fotossensibilizadores HP e ZnPc foram testados e provaram ser seguros para PDI no sêmen após avaliação dos parâmetros de qualidade e viabilidade espermática. Estes PS foram conjugados com a IgY-anti-BoHV-1 e testados em sêmen infectado experimentalmente com BoHV-1, sendo eficientes para a inativação completa do vírus dentro de cinco minutos de irradiação. Bovine alphaherpesvirus I (BoHV-1) poses a potential risk of infection to herds around the world, causing numerous economic losses related to both respiratory and reproductive infections. In the reproductive sphere, semen is an important source of spread of the virus to the herd. Thus, aiming at semen disinfection, photodynamic inactivation (PDI) was used as a viable alternative to conventional treatments. This technique involves the combination of a photosensitizing compound (PS), molecular oxygen and light, resulting in the generation of reactive oxygen species, capable of causing cell death by apoptosis, necrosis or autophagy. Several photosensitizing compounds are available on the market, however, new compounds are developed with the aim of improving efficiency against specific biological targets. Thus, this study evaluated the efficacy of palladium-bound porphyrins, halogenated sulfonated porphyrins, hematoporphyrins (HP) and tetracarboxy-phthalocyanine zinc (ZnPc), in vitro photodynamic inactivation BoHV-1. As well as, the development of immunoconjugates, composed by the direct conjugation between immunoglobulins (IgY anti-BoHV-1) and photosensitizers (ZnPc and HP) for PDI in semen. Among the photosensitizers tested, palladium porphyrins (dppf and dppe) at 10 μM showed better results in vitro, inactivating the virus completely with up to five minutes of irradiation. The photosensitizers HP and ZnPc were tested and proved to be safe for PDI in semen after evaluation of the parameters of quality and sperm viability. These PS were conjugated to IgY-anti-BoHV-1 and tested in semen infected experimentally with BoHV-1, being efficient for the complete inactivation of the virus within five minutes of irradiation. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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