Informe científico de Beca de Estudio: Cantatore, Sofía Ernestina (2014-2015)
| Autor: | Cantatore, Sofía Ernestina |
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| Přispěvatelé: | Fumuso, Elida Ana |
| Jazyk: | Spanish; Castilian |
| Rok vydání: | 2015 |
| Předmět: | |
| Zdroj: | CIC Digital (CICBA) Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires instacron:CICBA |
| Popis: | Durante los primeros meses de la beca, se llevó a cabo un entrenamiento en lectura de cortes histológicos de biopsias endometriales de yeguas de distintos grupos etarios, preparados con técnicas histológicas de rutina. A su vez, se realizó una revisión bibliográfica de lo estudiado hasta el momento sobre el tratamiento aplicado en el presente trabajo. Antes de comenzar con los muestreos, se procedió con la preparación y organización de todos los materiales necesarios para la toma de muestras, incluyendo lavaje endometrial, inseminación (extracción y procesamiento del semen), biopsia endometrial y para las maniobras de rutina en las revisaciones reproductivas diarias. Dado que el equino es una especie fotoperiódica positiva, se comenzó con el seguimiento ecográfico del sistema reproductivo de las yeguas a fines del mes de agosto. No obstante esto, las mismas no comenzaron a ciclar hasta mediados del mes de octubre, momento en el cual se comenzo con los muestreos. Actualmente se está trabajando con 5 yeguas resistentes (YR) y 5 yeguas susceptibles (YS) a endometritis. En un comienzo, se realizó la bacteriología y citología endometrial de la totalidad de los animales, utilizando como muestra el líquido recuperado tras realizar un lavaje endometrial. Se implementó una antibioticoterapia en aquellas yeguas que dieran un cultivo positivo mediante infusión local y se confirmó posteriormente si el mismo fue efectivo. Para esto, se realizó un nuevo cultivo el cual debía ser negativo para poder continuar con el proyecto; en aquellos casos en los que el cultivo continuó dando desarrollo bacteriano, se repitió la terapia con antibióticos, agregando nuevos antibióticos de acuerdo al antibiograma y aumentando el espectro de acción, hasta obtener un resultado negativo. Una vez realizado esto, se comenzó con la toma de muestras, la cual consiste en inseminar a los animales y, a intervalos previamente establecidos, realizar una biopsia endometrial. Para evitar el efecto acumulativo de la inflamación generada al tomar la muestra, se realizó una única biopsia endometrial por ciclo. Esto se realizó en todos los animales involucrados en el proyecto, y se repitió en las yeguas susceptibles agregando la administración de una dosis de dexametasona (DXT) al momento de la inseminación. Las biopsias endometriales tomadas hasta el momento se dividieron en dos fragmentos, colocando uno de ellos en RNAlater para la determinación de citoquinas, factores de desarrollo pro-inflamatorios y antiinflamatorias como: Interleuquinas: IL-1β, IL-15; IL-18; IL-6, IL-10, TNF-α (Factor de Necrosis tumoral alfa),TGF- β (Transforming Growth Factor Beta), mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en tiempo real según Fumuso, et al., 2007 y Horohov, et al., 2010; los mismos permanecieron durante 24 h a 4°C y posteriormente a -20°C, hasta su procesamiento. El fragmento restante se colocó en formol al 10% durante 8 horas, conservándolas luego en alcohol 70° hasta el momento de ser procesadas. Sobre éstas se aplicarán técnicas histológicas de rutina (Hematoxilina de Mayer y eosina) y especiales (tricrómica de Masson), así como también se determinarán iNOS de acuerdo a W Woodward (2013), receptores de estrógenos REα y Progesterona RP (Fumuso y et al 2012), Actina. Al día de la fecha se están tomando las últimas muestras. Una vez que se concluya con el muestreo, se comenzará con el procesamiento y análisis de las mismas. Una de las mayores dificultades presentadas en el trascurso del proyecto, fue la alteración en la ciclicidad de 3 de las yeguas, lo cual atrasó la toma de muestra de las mismas. Dos de ellas tuvieron que ser reemplazadas; una por presentar un anestro el cual no tuvo respuesta al tratamiento y otra de ellas por la formación reiterada de hematomas ováricos los cuales tardaban en resolver, no permitiendo a su vez que la yegua ciclara normalmente. La restante, tras un período de normal ciclicidad, ingresó en un estado de anestro, el cual respondió favorablemente al tratamiento hormonal. A pesar de eso, fue necesario repetirlo en reiteradas oportunidades, ya que de lo contrario, el anestro se imponía nuevamente. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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