Estudo metabol??mico de Penicillium sp. por meio de espectrometria de massas de alta resolu????o e redes moleculares

Autor: Peres, Eldrinei Gomes, https://orcid.org/0000-0002-5454-9088
Přispěvatelé: Koolen, Hector Henrique Ferreira, Costa, Emmanoel Vila??a, Medeiros, L??via Soman de, Novais, Alisson Meza
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2022
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM
Universidade Federal do Amazonas (UFAM)
instacron:UFAM
Popis: Submitted by Eldrinei Peres (eldrinei_peres@hotmail.com) on 2022-03-01T01:45:15Z No. of bitstreams: 3 Disserta????o de Mestrado - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 3826030 bytes, checksum: 303d2687a91868f04346c640774612fe (MD5) Carta de Encaminhamento de Dissertacao - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 104153 bytes, checksum: 1db1920e16ed08b8e8b6770bb582080f (MD5) Folha de Aprova????o - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 318050 bytes, checksum: a15f371a8d5b3d0f070fa7064c06a4e6 (MD5) Approved for entry into archive by PPGQ Qu??mica (ppgqsecretaria@gmail.com) on 2022-03-03T19:58:16Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Disserta????o de Mestrado - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 3826030 bytes, checksum: 303d2687a91868f04346c640774612fe (MD5) Carta de Encaminhamento de Dissertacao - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 104153 bytes, checksum: 1db1920e16ed08b8e8b6770bb582080f (MD5) Folha de Aprova????o - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 318050 bytes, checksum: a15f371a8d5b3d0f070fa7064c06a4e6 (MD5) Approved for entry into archive by Divis??o de Documenta????o/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2022-03-04T16:42:13Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Disserta????o de Mestrado - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 3826030 bytes, checksum: 303d2687a91868f04346c640774612fe (MD5) Carta de Encaminhamento de Dissertacao - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 104153 bytes, checksum: 1db1920e16ed08b8e8b6770bb582080f (MD5) Folha de Aprova????o - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 318050 bytes, checksum: a15f371a8d5b3d0f070fa7064c06a4e6 (MD5) Made available in DSpace on 2022-03-04T16:42:13Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Disserta????o de Mestrado - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 3826030 bytes, checksum: 303d2687a91868f04346c640774612fe (MD5) Carta de Encaminhamento de Dissertacao - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 104153 bytes, checksum: 1db1920e16ed08b8e8b6770bb582080f (MD5) Folha de Aprova????o - Eldrinei Gomes Peres.pdf: 318050 bytes, checksum: a15f371a8d5b3d0f070fa7064c06a4e6 (MD5) Previous issue date: 2022-01-28 CAPES - Coordena????o de Aperfei??oamento de Pessoal de N??vel Superior Metabolomics is a tool with varied applications and of great importance in screening and discovery of new bioactive compounds of natural origin, using advanced analytical techniques and chemoinformatics. By means of metabolomics, compounds with diverse biotechnological applications were identified and isolated from different organisms. Among the main sources of bioactive compounds, plants and microorganisms stand out. Among the latter, fungi present themselves as sources of metabolites with different biological activities with great economic importance. In this sense, this work aimed to use a metabolomics approach through mass spectrometry and molecular networks for a comprehensive characterization of the secondary metabolites of Penicillium sp. MMSRG-058 and mutant strains of biotechnological interest. To obtain the Penicillium sp., fermentation cultures were carried out by the OSMAC method, using four different culture media (BDL, ISP2, CZAPECK and Carne2), under different conditions, such as static and agitated. Both, the liquid fraction and the mycelium were used, using ethyl acetate and methanol as extracting solvents. Extracts were analyzed using HPLC-HRMS/MS and molecular networks. The analysis of both the networks and the manual interpretation of the MS/MS spectra allowed the identification of more than 30 molecules, most of which as part of polyketides class, specifically azaphilones, among them sclerotioramine, isochromophilone I, II, VI and IX, sclerotiorine and ocrephillone. The production of different molecules in different media and conditions showed a significant difference, with the presence of distinct molecules or even specificity in some cases. In the HPLC-HRMS/MS data of the mutant strains of Penicillium sp., all the polyketides produced by the wild strain were absent, with the exception of the meroterpenoid atlantinone A as the major ion. This same molecule was found in small amounts in only three culture media of the wild strain. A significant number of metabolites still lacks of identification, evidencing the metabolic capacity of Penicillium sp., under different conditions. The study using the metabolomics approach involving analytical techniques and molecular networks allowed the metabolic characterization of the fungus explored, as well as the annotation of molecules of biotechnological interest. A metabol??mica ?? uma ferramenta com aplica????es variadas e de grande import??ncia na explora????o e descoberta de novos compostos bioativos de origem natural, utilizando t??cnicas anal??ticas avan??adas e quimioinform??tica. Por meio da mesma, compostos com aplica????es biotecnol??gicas diversas foram identificados e isolados de diferentes organismos. Entre os principais produtores de compostos bioativos, destacam-se as plantas e os microrganismos. Entre os ??ltimos, os fungos apresentam-se como produtores de metab??litos com diversas atividades biol??gicas com grande import??ncia econ??mica. Neste sentido, este trabalho teve como objetivo utilizar abordagem metabol??mica atrav??s da espectrometria de massas e redes moleculares para uma caracteriza????o compreensiva dos metab??litos secund??rios de Penicillium sp. MMSRG-058 e linhagens mutantes de interesse biotecnol??gico. Para obten????o dos extratos de Penicillium sp., foram realizados cultivos fermentativos pelo m??todo OSMAC, utilizando quatro meios de cultivo distintos (BDL, ISP2, CZAPECK e Carne2), em diferentes condi????es, est??tico e agitado. Foram utilizados tanto a fra????o l??quida quanto o mic??lio utilizando como solventes extratores acetato de etila e metanol. Os extratos foram analisados por meio de HPLC-HRMS/MS e redes moleculares. A an??lise tanto das redes como a interpreta????o manual dos espectros de MS/MS permitiu a identifica????o de mais de 30 mol??culas, sendo a maioria pertencente ?? classe dos policet??deos, especificamente, ??s azafilonas, dentre elas a esclerotioramina, isocromofilona I, II, VI e IX, esclerotiorina e ocrefilona. A produ????o das diversas mol??culas nos diferentes meios e condi????es, apresentou uma significativa diferen??a, com presen??a de mol??culas distintas ou mesmo, especificidade em alguns casos. Nos dados de HPLC-HRMS/MS da linhagem mutante de Penicillium sp., houve a aus??ncia de todos os policet??deos produzidos pela linhagem selvagem, tendo sido dectado apenas um meroterpenoide denominado de atlantinona A como ??on majorit??rio. Esta mesma mol??cula foi encontrada em pequena quantidade em apenas tr??s meios de cultivo da linhagem selvagem. Uma quantidade significativa de metab??litos ainda precisa ser identificada, evidenciando a capacidade metab??lica de Penicillium sp., em diferentes condi????es. O estudo por meio da abordagem metabol??mica envolvendo t??cnicas anal??ticas e redes moleculares possibilitou a carateriza????o metab??lica do fungo explorado, bem como a anota????o de mol??culas de interesse biotecnol??gico.
Databáze: OpenAIRE
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