Alterations in cellular response to the treatment with chlorophyll associated with cytotoxic agents in vitro
| Autor: | Gláucia Fernanda Rocha D'Epiro |
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| Přispěvatelé: | Mário Sérgio Mantovani ., Lucia Regina Ribeiro, Edson Luis Maistro, Daniele Sartori, Sandra Lepri |
| Jazyk: | portugalština |
| Rok vydání: | 2016 |
| Zdroj: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UEL Universidade Estadual de Londrina (UEL) instacron:UEL |
| Popis: | A clorofilina (Chl) é um corante de alimentos derivado da clorofila que apresenta atividade quimioprotetora. Entretanto, seus mecanismos de ação não estão totalmente elucidados. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade quimioprotetora da clorofilina em células expostas aos agentes antitumorais doxorrubicina (Dox) e edelfosina (EDLF) e ao mutágeno ambiental benzo(a)pireno (BaP). No primeiro capítulo, as células HepG2/C3A (linhagem metabolizadora de hepatoma humano) foram expostas à Chl (25, 50, 100 e 200 µM) associada à Dox (3 ou 0,1 µM) ou ao BaP (20 µM). A análise do ciclo celular mostrou que a Chl (200 µM) foi capaz de restabelecer a distribuição normal do ciclo celular e de inibir a morte celular induzida pela Dox (0,1 µM) e o BaP (20 µM). A Dox e o BaP reprimiram a expressão dos genes envolvidos na progressão do ciclo celular (CCNA2, CCNB1, CCND1 e CCNE1, CDK1 e CDK2) e apoptose (BAX, CASP7 e TP53), entretanto, a associação com clorofilina não causou alteração dessa resposta. No segundo capítulo, a linhagem HeLa (linhagem não metabolizadora de câncer cervical humano) recebeu os tratamentos com a Chl (100 e 200 µM) combinada com a Dox (0,1µM), EDLF (10µM) e BaP (20 µM) por 24, 48 e 72 h. A Chl não apresentou citotoxicidade e nos tratamentos associados com os três agentes (Dox, EDLF e BaP) foi capaz de atenuar o efeito citostático e reduzir a população de células apoptóticas (subG1). Porém, a Chl não foi eficaz em inibir a expressão do marcador de autofagia, LC3-II, e do marcador de apoptose, PARP clivada, induzida pelos agentes citotóxicos. Portanto, em ambos os casos, a Chl atenuou os efeitos citotóxicos e citostáticos dos agentes Dox, EDLF e BaP, o que sugere sua atividade quimioprotetora mediante à toxicidade induzida por diferentes compostos. Chlorophyllin (Chl) is a food colorant derived from chlorophyll that has chemoprotective activity. However, its mechanisms of action are not entirely elucidated. The aim of this study was to evaluate the chemoprotective activity of chlorophyllin in cells exposed to the antitumor agents doxorubicin (Dox) and edelfosine (EDLF) and benzo(a)pyrene (BaP), an environmental mutagen. First, the HepG2 / C3A cells (metabolizing line of human hepatoma) were exposed to Chl (25, 50, 100 and 200 mM) alone and associated to Dox (3 or 0.1 mM) or BaP (20 uM). The cell cycle analysis showed that Chl (200 uM) was able to restore the normal cell cycle distribution and inhibit the cell death induced by Dox (0.1 mM) and BaP (20 uM). The Dox and BaP caused down-regulation of mRNA levels of genes involved in cell cycle progression (CCNA2, CCNB1, CCND1, and CCNE1, CDK1 and CDK2) and apoptosis (BAX, CASP7, and TP53), but the association with chlorophyllin not caused change in this response. In the second chapter, HeLa (lineage not metabolizing human cervical cancer) received treatments with Chl (100 and 200 uM) alone and combined with Dox (0,1?M) EDLF (10?M) and BaP (20 uM) for 24, 48 and 72 h. Chl showed no cytotoxicity and treatments associated with the three agents (Dox, EDLF and BaP) was able to mitigate the cytostatic effect and reduce the population of apoptotic cells (Sub G1). However, the Chl was not effective in inhibiting the expression of autophagy marker LC3-II and apoptosis marker, cleaved PARP, induced by cytotoxic agents. Therefore, in both cases, the Chl attenuated cytotoxic and cytostatic effects of Dox agents, EDLF and BaP, which suggests its chemoprotective activity by the toxicity induced by different compounds. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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