CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE LA TIORREDOXINA DEL CAMARÓN BLANCO (Litopenaeus vannamei)

Autor: EMMANUEL AISPURO HERNANDEZ
Přispěvatelé: ROGERIO RAFAEL SOTELO MUNDO, KARINA DALILA GARCIA OROZCO, GLORIA MARTINA YEPIZ PLASCENCIA, ANA MARIA CALDERON DE LA BARCA COTA
Jazyk: Spanish; Castilian
Rok vydání: 2008
Předmět:
Zdroj: Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo
CIAD
Repositorio Institucional del CIAD
Popis: El sistema tiorredoxina (Trx) es uno de los sistemas antioxidantes que forma parte del mecanismo innato de defensa en invertebrados. El objetivo de este trabajo fue caracterizar bioquímicamente a la Trx recombinante de camarón(LvTrx) e investigar su capacidad antioxidante intrínseca. Considerando que la secuencia aminoacídica de la Trx de camarón (GenBank EU499301) tiene una cisteína en una posición que permite la dimerización en la Trx humana (C73), también se investigó el potencial de dimerización de la LvTrx. La LvTrx se sobreexpresó en E. coli y se purificó a homogeneidad mediante cromatografía de intercambio aniónico, obteniéndose un rendimiento final de 12.98 mg por Lde cultivo bacteriano. La identidad de la proteína recombinante se confirmó mediante espectrometría de masas MALDI-TOF. La LvTrx mostró actividad reductora de disulfuros de la insulina in vitro, con una actividad específica de 10.44 .0.A650nm/mg min. Además, presentó una actividad antioxidante de 1.95 mMET, mayor que los controles (glutatión reducido, vitamina C y lisozima de clara de huevo de gallina), utilizando el ensayo TEAC (Capacidad Antioxidante Equivalente al Trolox). También se demostró su capacidad de protección al ADN del daño causado por radicales hidroxilo. Por otro lado, mediante SDSPAGE se observó la formación del dímero covalente después del tratamiento con diamida, un agente oxidante. Estos resultados muestran que la LvTrx es un antioxidante per se y que al igual que la Trx de mamíferos, tiene la capacidad de formar dímeros covalentes. Lo anterior, da pie a la realización de futuros estudios sobre la relación entre las características bioquímicas y estructurales de la LvTrx y sus funciones en camarón.
Databáze: OpenAIRE
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