Evaluation of antimicrobial photodynamic therapy in Aggregatibacter actinomycetemcomitans mediated by methylene blue in a surfactant vehicle

Autor: Anselmo, Giuliana Giovinazzo
Přispěvatelé: Prates, Renato Araujo, Marcos, Rodrigo Labat, Motta, Lara Jansiski, Ana, Patricia Aparecida da, Zamuner, Stella Regina
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2020
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Uninove
Universidade Nove de Julho (UNINOVE)
instacron:UNINOVE
Popis: Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2021-11-04T14:37:35Z No. of bitstreams: 1 Giuliana Giovinazzo Anselmo.pdf: 827847 bytes, checksum: 3ae7d7d1530aa881772829a133643ecb (MD5) Made available in DSpace on 2021-11-04T14:37:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Giuliana Giovinazzo Anselmo.pdf: 827847 bytes, checksum: 3ae7d7d1530aa881772829a133643ecb (MD5) Previous issue date: 2020-08-27 Periodontal disease is a public health problem and has a higher incidence in the adult population, which can lead to loss of teeth. Its treatment is the elimination of pathogens present in the periodontal pocket. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) has been studied as an aid in this treatment, but in the oral environment, the photochemical effects encounter challenges such as dimming the photosensitizer (FS). The use of sodium dodecyl sulfate (SDS) produces the chemical breakdown of FS and has been shown as an alternative to PDT. The aim of this study was to investigate the effect of aPDT mediated by methylene blue (AM) on a periodontal pathogen in a vehicle with SDS. The behavior of aPDT mediated by methylene blue (AM) in phosphate buffered solution (PBS) and 0.25% surfactant vehicle (SDS) was evaluated. For this purpose, inoculum of pure strain of A. actinomycetemcomitans ATCC 29523 was grown from stocks in brain and heart infusion agar (BHI) at 37 ° C in a microaerophilic environment. The aPDT was performed with a diode laser (Photon Lase III, DMC, São Carlos, Brazil) with a wavelength of 660 nm, output power of 100 mW, well irradiation of 250 mW / cm2, energy of 6.18 and 30 J corresponding to the times of 60, 180 and 300s and radiant exposure of 15, 45, 75 J / cm2, respectively. Microbial death was evaluated by counting colony-forming units (CFU); the incorporation of FS by the bacteria was evaluated by optical absorption spectroscopy of the supernatant; as well as the morphology of microorganisms was investigated by scanning electron microscopy (SEM). The results indicated that aPDT with AM in PBS reduced 4.8 logs of bacterial death, however, the association with SDS reduced the effect of aPDT considerably, by 1.45 logs. The presence of 0.25% SDS in this bacterium caused an 80% reduction in the incorporation of AM, and the SEM images indicate that clusters of extracellular substances are formed in contact with SDS. It was concluded that aPDT in 0.25% SDS was ineffective in A. actinomycetemcomitans; the same in contact with this periodontopathogen, prevented the entry of FS in the bacteria. A doença periodontal é um problema de saúde pública e tem maior incidência na população adulta, podendo levar a perda da dentição. Seu tratamento é a eliminação de patógenos presentes na bolsa periodontal. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) vem sendo estudada como auxiliar neste tratamento, porém no ambiente bucal, os efeitos fotoquímicos encontram desafios como a dimerização do fotossensibilizador (FS). O uso de dodecil sulfato de sódio (SDS) produz a desagregação química do FS e vem se mostrando como alternativa para aPDT. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito da aPDT mediada por azul de metileno (AM) em um patógeno periodontal em veículo com SDS. Foi avaliado o comportamento da aPDT mediada por azul de metileno (AM) em solução tamponada com fosfato (PBS) e em veículo surfactante (SDS) à 0,25%. Para tanto, inóculo de cepa pura de A. actinomycetemcomitans ATCC 29523 foi crescida de estoques em ágar de infusão de cérebro e coração (BHI) à 37°C em atmosfera de microaerofilia. A aPDT foi realizada com laser diodo (Photon Lase III, DMC, São Carlos, Brasil) com comprimento de onda de 660 nm, potência de saída de 100 mW, irradiação do poço de 250 mW/cm2, energia de 6,18 e 30 J correspondente aos tempos de 60, 180 e 300s e exposição radiante de 15, 45, 75 J/cm2, respectivamente. Foi avaliado a morte microbiana por contagem de unidades formadoras de colônias (UFC); a incorporação de FS pelas bactérias foi avaliada por espectroscopia de absorção óptica do sobrenadante; bem como a morfologia de micro-organismos foi investigada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os resultados indicaram que a aPDT com AM em PBS levou à redução 4,8 logs (ordens de grandeza) de morte bacteriana, porém, a associação com SDS diminuiu o efeito da aPDT consideravelmente para 1,45 logs. A presença de SDS 0,25% nesta bactéria provocou uma redução de 80% na incorporação de AM, e as imagens de MEV indicam que aglomerados de susbstâncias extracelulares são formadas em contato com SDS. Concluí-se que a aPDT em SDS a 0,25% impediu a ação fotodinâmica em A. actinomycetemcomitans; o mesmo em contato com este periodontopatógeno, impediu a entrada do FS na bactéria.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: