Desenvolvimento e diagnóstico da resistência anti-helmíntica em populações de haemonchus contortus no estado do Ceará

Autor: SANTOS, J. M. L. dos
Přispěvatelé: Jessica Maria Leite dos Santos.
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2017
Předmět:
Zdroj: Repositório Institucional da EMBRAPA (Repository Open Access to Scientific Information from EMBRAPA-Alice)
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa)
instacron:EMBRAPA
Popis: Resumo: Os nematoides gastrintestinais são um dos principais fatores limitantes na criação de pequenos ruminantes no mundo. Os benzimidazóis (BZ), as lactonas macrocíclicas (LM) e os imidazotiazóis são os anti-helmínticos mais utilizados para o controle desses parasitas. Contudo, o uso de fármacos leva inevitavelmente ao desenvolvimento de resistência anti-helmíntica (RAH). O diagnóstico de RAH é realizado principalmente por meio de métodos fenotípicos com baixa sensibilidade. Dessa forma, métodos moleculares, são necessários para melhorar a capacidade de detecção da RAH. Os objetivos desse trabalho foram avaliar o estado da RAH em nematoides gastrintestinais de ovinos no Ceará, investigar a relação entre a resistência a BZ e LM e padronizar técnica de diagnóstico de resistência molecular a levamisol (LEV) em H. contortus. Para tanto, o trabalho foi dividido em três experimentos. No experimento I foi realizado um levantamento da situação da resistência a BZ por meio do teste de eclosão de ovos (TEO) e da PCR em tempo real (qPCR) para identificar os polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) F167Y, F200Y e E198A. No experimento II foi realizada a seleção para resistência do isolado de H. contortus Inbred-Susceptible Edinburgh (ISE) com doses crescentes de oxifendazol (OXF), ivermectina (IVM) e oxifendazol mais ivermectina (IVMOXF). O desenvolvimento da resistência foi avaliado por qPCR, TEO para BZ e teste de desenvolvimento larva (TDL) para ivermectina. No terceiro experimento foi realizado a qPCR para o diagnóstico de resistência a LEV, baseando-se na deleção de 63pb no gene Hco-acr-8b codificante para os receptores nicotínicos de acetilcolina. Foram testadas 26 populações de H. contortus: Kokstad (LEV resistente), ISE (LEV susceptível) e 24 populações obtidas de rebanhos no estado do Ceará. Foi realizado o TDL para LEV em cinco isolados de campo. No experimento I a concentração efetiva média para inibir 50% da eclosão de ovos (CE50) no TEO foi de 2,46 ?g/mL (± 0,58 ?g/mL) e a resistência a BZ foi detectada em todas as fazendas pesquisadas. As frequências médias de alelos resistentes nos códons F200Y, F167Y e E198A foram 34,16% (± 12,13%), 58,31% (± 18,89%) e 0,016 (±0,012), respectivamente. No experimento II todos os tratamentos levaram ao aumento da frequência de alelos resistentes para os SNP F200Y e F167Y (p
Databáze: OpenAIRE