A importância do controle de qualidade de culturas utilizadas em ensaios biológicos e no desenvolvimento de pesquisas na área de saúde

Autor: Folgueras-Flatschart, Aurea Valadares, Gomes, Bruno Cosme, Leve, Fernanda, Boldrini, Leonardo da Cunha
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2018
Předmět:
Zdroj: Health Surveillance under Debate: Society, Science & Technology ; Vol. 6 No. 1 (2018): Fevereiro-Tecnologias celulares avançadas: desafios biotecnológicos e regulatórios; 96-108
Vigilancia en Salud en Debate: Sociedad, Ciencia y Tecnología; Vol. 6 Núm. 1 (2018): Fevereiro-Tecnologias celulares avançadas: desafios biotecnológicos e regulatórios; 96-108
Vigil Sanit Debate, Rio de Janeiro; v. 6 n. 1 (2018): Fevereiro-Tecnologias celulares avançadas: desafios biotecnológicos e regulatórios; 96-108
Vigilância Sanitária em Debate
Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz)
instacron:FIOCRUZ
ISSN: 2317-269X
Popis: Introduction: Advances in scientific research are based on previously published findings. However,there is concern about the lack of reproducibility in the biological researches in basic and preclinical areas, due to the repercussion on the population´s health. Because in vitro cultured cells are the basis for many toxicological and therapeutic studies, concern about their quality becomes paramount. Regarding microbiological contaminants, although bacteria and fungi are easily recognized, viruses and mycoplasmas are invisible under light microscopy. Another delicate issue would be the results generated with cells with modified identity. Objective: To discuss the main methodologies for assuring the quality of cells used in in vitro assays and to demonstrate how some world collections are structured to address this issue. Method: The scientific literature in the PubMed and Scielo databases and the webpage of different biological collections until December 2017. Results: It is recommended to apply the following techniques to detect contaminants in cell cultures: 1) virus : PCR and viral isolation; 2) mycoplasmas: PCR,bioluminescence and staining of cells with DNA affinity fluorophore; 3) human cell identity: the STR; 4) non-human cell identity: the Barcode. Conclusions: Considering all the investment applied in scientific research worldwide, the development of new methodologies alternatives to the use of animals and the critical consensus of the concept of quality, it is concluded that any laboratory should guarantee the control of purity and authenticity of its lineages. Introdução: Avanços na pesquisa científica baseiam-se nas descobertas previamente publicadas. Entretanto, há preocupação com a falta de reprodutibilidade nas pesquisas biológicas das áreas básica e pré-clínica, em função da repercussão na saúde da população. Como células cultivadas in vitro constituem a base para muitos estudos toxicológicos e terapêuticos, a preocupação com a qualidade destas torna-se primordial. Com relação aos contaminantes microbiológicos, embora bactérias e fungos sejam facilmente reconhecidos, vírus e micoplasmas são invisíveis na microscopia óptica. Outro problema delicado seriam os resultados gerados com células com identidade modificada. Objetivo: Discutir as principais metodologias para a garantia da qualidade de células utilizadas em ensaios in vitro e demonstrar como algumas coleções mundiais estão estruturadas para tratar esta questão. Método: Levantamento da literatura científica nas bases de dados PubMed e Scielo e na página da web de diferentes coleções biológicas até dezembro de 2017. Resultados: Recomenda-se a aplicação das seguintes técnicas para detecção de contaminantes em cultivos celulares: 1) vírus: o PCR e o isolamento viral; 2) micoplasmas: o PCR, a bioluminescência e a coloração das células com fluoróforo com afinidade ao DNA; 3) identidade de células humanas: o STR; 4) identidade de células não humanas: o Barcode. Conclusões: Considerando todo o investimento aplicado em pesquisa científica em âmbito mundial, o desenvolvimento de novas metodologias alternativas ao uso de animais e o consenso crítico do conceito de qualidade, conclui-se que qualquer laboratório deve garantir o controle de pureza e autenticidade de suas linhagens.
Databáze: OpenAIRE
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