Desenvolvimento e padronização de um ELISA indireto para diagnóstico de Maedi Visna em ovinos
| Autor: | DANTAS, T. V. M., ARAÚJO, S. A. C. de, PINHEIRO, R. R., ARAGÃO, M. A. do C., SILVA, J. B. A. da, RICARTE, A. R. F., RIBEIRO, A. L., TEIXEIRA, M. F. da S. |
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| Přispěvatelé: | Tânia Valeska Medeiros Dantas, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE), Suzana Aparecida Costa de Araújo, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE), RAYMUNDO RIZALDO PINHEIRO, CNPC, Maria Alzira do Carmo Aragão, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE), Jean Berg Alves da Silva, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE), Aracely Rafaelle Fernandes Ricarte, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE), Adriana Lopes Ribeiro, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE), Maria Fátima da Silva Teixeira, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE). |
| Jazyk: | portugalština |
| Rok vydání: | 2008 |
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| Zdroj: | Repositório Institucional da EMBRAPA (Repository Open Access to Scientific Information from EMBRAPA-Alice) Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa) instacron:EMBRAPA |
| Popis: | O objetivo deste trabalho foi desenvolver e padronizar um ELISA indireto para diagnóstico de Maedi Visna (MV). Produziu-se o antígeno em sobrenadantes de cultivo celular de membrana sinovial caprina (MSC) inoculado com o Maedi Visna Vírus (MVV) cepa K1514, que passou por ciclos de congelamento e descongelamento, sendo logo após clarificado por centrifugação a 3.000 g por 40 minutos A suspensão clarificada foi precipitada por PEG 8000, centrifugada a 12.000 g por 60 minutos, o pellet ressuspendido em TNE (Tampão Tris-HCl, NaCl, EDTA) e ultracentrifugado a 42.000 g por 105 minutos em colchão de sacarose, e ressuspendido em PBS contendo phenylmethylsulphonyl fluoride (PMSF). Realizou-se o ELISA em microplacas de 96 poços, incubadas por 1h a 37 ºC, utilizando-se como revelador o-phenylenediamine (OPD). Para a comparação entre os testes de ELISA e AGID, utilizaram-se 175 amostras de soros. A concentração ótima do antígeno foi a de 2 µg/mL e a melhor diluição dos soros, controles e testes de 1:100. O ELISA detectou um maior número de positivos (40) que o AGID (11), apresentando uma sensibilidade de 91%, especificidade de 82%. O ELISA promoveu uma melhor sensibilidade que o AGID. Embora sua especificidade tenha ficado abaixo do esperado, seu uso pode ser indicado como teste de diagnóstico de MVV. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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