Evaluation of the immunogenicity and potency of a vaccine against Porcine Circovirus (PCV2) in mice

Autor: Martins, Vitor Barbosa Fialho
Přispěvatelé: Universidade Estadual Paulista (Unesp), Montassier, Hélio José [UNESP]
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2022
Předmět:
Zdroj: Repositório Institucional da UNESP
Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron:UNESP
Popis: Submitted by Vitor Barbosa Fialho Martins (vitor.fialho@unesp.br) on 2022-05-03T10:11:00Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado - Vitor_Martins_Definitivo_.pdf: 2604031 bytes, checksum: dfd722070533b517c3b05f37fcfbc203 (MD5) Approved for entry into archive by Laudicélia Martins Arantes (lm.arantes@unesp.br) on 2022-05-03T12:06:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 martins_vbf_me_jabo.pdf: 2604031 bytes, checksum: dfd722070533b517c3b05f37fcfbc203 (MD5) Made available in DSpace on 2022-05-03T12:06:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 martins_vbf_me_jabo.pdf: 2604031 bytes, checksum: dfd722070533b517c3b05f37fcfbc203 (MD5) Previous issue date: 2022-03-04 O circovirus suíno Tipo 2 (PCV2) e as doenças associadas a ele (PCVAD) geram grandes perdas para a suinocultura mundial. Além de outras medidas de prevenção para reduzir a disseminação dessa doença infecciosa, a vacinação é um dos meios mais eficientes de se controlar a circovirose nos rebanhos suínos. Há diversos tipos de vacinas comercialmente disponíveis contra o circovirus, sendo que estas devem ser atualizadas com base na evolução que os genótipos prevalentes de PCV2 têm sofrido ao longo dos anos. Assim, o presente estudo propôs a realização de dois experimentos: o primeiro teve o objetivo de comparar a resposta imune humoral anti-PCV2 em camundongos isogênicos e heterogênicos induzidas por vacinas comerciais contra este vírus e o segundo teve o objetivo de se estabelecer um modelo de avaliação da potência de vacinas contra o Circovirus Suíno em camundongos. Para a realização do Experimento 1 foram testadas duas vacinas comerciais contra o PCV2, sendo uma baseada no genótipo “a” e outra no genótipo “b” de PCV2, nas linhagens C57BL/6 e Balb/C e no estoque heterogênico Swiss. Os soros dos animais vacinados foram submetidos à mensuração de anticorpos anti-PCV2 pelo método indireto de ELISA e as médias de DOs obtidas nesse ensaio foram avaliadas e submetidas à análise estatística. Já no Experimento 2, o estoque heterogênico de camundongos Swiss foi escolhido para a realização do delineamento que contou com o mesmo esquema vacinal utilizado no Experimento 1 e foi seguido por desafio com PCV2b em três momentos. Os animais tiveram o sangue colhido e foram então eutanasiados em três momentos para avaliação da resposta imune humoral por ELISA indireto e análise da carga viral de PCV2 em sangue total e tecidos (rim, baço, pulmões e linfonodo). Os resultados demonstraram a capacidade de camundongos isogênicos e heterogênicos vacinados em gerar anticorpos contra PCV2 baseada em soroconversão e títulos end-point avaliados, além de demonstrar não haver diferença estatística (p = 0,063) entre os níveis de anticorpos dos grupos testados. Quanto ao modelo de potência, foi possível ratificar os dados obtidos no Experimento 1, com relação à resposta imune humoral e identificar que camundongos Swiss não são capazes de desenvolver sinais clínicos e apresentar viremia e carga viral em pulmões analisados pela técnica de qPCR de acordo com o delineamento utilizado. Apesar disso, conclui-se que camundongos Swiss podem ser utilizados como modelo para avaliação de resposta imune humoral e estudos de potência baseados em perfil sorológico dos animais submetidos à vacinação contra PCV2. Porcine circovirus Type 2 (PCV2) and its associated diseases (PCVAD) generate large losses for a worldwide swine industry. In addition to other preventive measures to reduce the spread of this infectious disease, vaccination is one of the most efficient ways to control circovirus in swine herds. There are several types of vaccines commercially available against circovirus, and a current update is needed because of the evolution that the prevalent PCV2 genotypes have undergone over the years. Thus, the present study proposed the performance of two experiments, the first with the objective of comparing an anti-PCV2 humoral immune response in isogenic and heterogeneous mice induced by commercial vaccines against this virus and the second with the objective of establishing a model for evaluating the potency of vaccines against the Swine Circovirus in a mouse model. To carry out Experiment 1, two commercial vaccines against PCV2 were tested, one based on the “a” genotype and the other on the “b” PCV2 genotype, on the C57BL/6 and Balb/C lines and on the Swiss heterogeneous stock. Sera from vaccinated animals were subjected to measurement of anti-PCV2 antibodies by indirect ELISA method and means of ODs were evaluated and submitted to statistical analysis. In Experiment 2, Swiss mice was chosen to carry out the design that had the same vaccination schedule used in Experiment 1 and was followed by challenge with PCV2b at three times. . The animals had their blood collected and were then euthanized at three times to assess the humoral immune response by indirect ELISA and analysis of the viral load of PCV2 in whole blood and tissues (kidney, spleen, lungs and lymph node). The results demonstrated the ability of isogenic and heterogeneous vaccinated mice to generate antibodies against PCV2 based on seroconversion and evaluated end-point titers, in addition to demonstrating that there was no statistical difference (p = 0.063) between the antibody levels of the groups tested. As for the potency model, it was possible to confirm the data obtained in Experiment 1, regarding the humoral immune response and to identify that Swiss mice are not able to develop clinical signs, and present viremia and viral load in the lungs analyzed by qPCR technique according to the design used. Despite this, it is concluded that Swiss mice can be used as a model for evaluating the humoral immune response and potency studies based on the serological profile of the animals submitted to vaccination against PCV2, with a possibility of correlation of the data obtained in this model, when compared to the target species of the vaccine evaluated.
Databáze: OpenAIRE
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