Deleção dos genes yadC e yicS de uma linhagem SCI-07 de Escherichia coli patogênica para aves (APEC) e suas contribuições para a patogenicidade

Autor: Verma, Renu, 1987
Přispěvatelé: Dias da Silveira, Wanderley, 1956, Rojas, Thaís Cabrera Galvão, 1980, Sircili, Marcelo Palma, Ramos, Marcelo de Carvalho, Cipriano, Matheus Aparecido Pereira, Paiva, Jacqueline Boldrin de, Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia, Programa de Pós-Graduação em Genética e Biologia Molecular, UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
Rok vydání: 2016
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
Popis: Orientadores: Wanderley Dias da Silveira, Thais Cabrera Galvão Rojas Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O Brasil é o terceiro maior produtor e primeiro exportador de carne de aves do mundo. A bactéria Escherichia coli patogênica para aves (APEC) é responsável por perdas econômicas significativas nesta multi milionária indústria, causando infecções sistêmicas ou localizadas conhecidas coletivamente como colibacilose. Apesar de sua importância, os mecanismos de virulência destes patótipo não foram, ainda, totalmente elucidados. Portanto, neste trabalho, o nosso objetivo foi estudar genes, que poderiam estar potencialmente envolvidos na patogenicidade de uma linhagem APEC, isolada de uma galinha que apresentava sinais clínicos da síndrome da cabeça inchada (SCI-07; O não tipável: H31). Dois genes yadC e yicS, que estavam sob seleção positiva, foram escolhidos para serem deletados e suas contribuições para vários fenótipos relacionados ao processo de patogênese, avaliadas. Para isso, as linhagens mutantes e complementadas foram comparadas com a linhagem selvagem em vários testes, tais como mortalidade, motilidade, ensaios de sobrevivência de macrófagos, adesão e invasão. A linhagem ?yadC mostrou uma menor capacidade de aderência em células epiteliais humana (HeLa) e reduzida capacidade de invasão de células Hep-2, bem como diminuição da capacidade de sobrevivência em macrófagos de origem aviárias (HD11 células). Esta linhagem mutante também níveis reduzidos de mortalidade e apresentou capacidade reduzida na infecção sistêmica. A linhagem ?yicS apresentou diminuição do nível de invasão em CEC-32 e em Hep-2, motilidade reduzida e uma menor capacidade de formação de biofilme. Este mutante apresentou, também, uma diminuição na mortalidade e uma diminuição do número de bactérias recuperadas no teste de infecção sistêmica. Considerando os resultados obtidos neste trabalho é possível concluir que estes genes contribuem e são importantes para o processo de infecção e patogenicidade da linhagem SCI-07 Abstract: Brazil is the third largest producer and first exporter of poultry meat worldwide. Avian Pathogenic Escherichia coli (APEC) is responsible for significant economic losses in multi-million dollar in the industry, by causing systemic or localized diseases collectively known as colibacillosis. Besides its importance, the virulence mechanisms of these pathotypes have not been fully elucidated yet. Therefore, in this work, our aim was to study genes, which could be potentially involved in the pathogenicity of an APEC strain isolated from a chicken presenting clinical signs of Swollen Head Syndrome (strain SCI-07; nontypeable O: H31). Two genes yadC and yicS, which were demonstrated under positive selection, were chosen to be deleted and their contribution to several phenotypes related to pathogenesis process were further evaluated. For this, the mutated and complemented strains were compared to the wild type strain in several tests, such as mortality, motility, survival in macrophage, adhesion and invasion assays. The mutant yadC showed a decreased adhesion capacity in human epithelial (HeLa cells) and reduced ability in invasion to epithelial cells (Hep-2 cells) as well as decreased capacity of survival in avian macrophages (HD11 cells). The mutant also reduced mortality levels, as well as a reduced ability in the systemic animal infection experiment. The mutant yicS showed a decreased invasion level in CEC-32 cells and Hep-2 cell, reduced motility and a lower capacity of biofilm formation. This mutant also presented a decrease in mortality in one-day old-chicks model and systemic infection experiments. Taken together, these results indicate that these genes contribute to the infectious process and are important for the pathogenicity of strain SCI-07 Doutorado Microbiologia Doutora em Genética e Biologia Molecular FAPESP 2012/23289-3
Databáze: OpenAIRE
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