Características funcionais de células tronco mesenquimais cardíacas na cardiomiopatia tóxica hiperadrenérgica em ratos

Autor: NUNES, Douglas Caixeta
Přispěvatelé: SILVA, Valdo José Dias da, ASSUNÇÃO, Thaís Soares Farnesi de
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2019
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFTM
Universidade Federal do Triangulo Mineiro (UFTM)
instacron:UFTM
Popis: Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar algumas propriedades funcionais de células tronco mesenquimais cardíacas (“cardiac mesenchymal stem cells”- cMSCs) no modelo experimental em ratos da cardiomiopatia hiperadrenérgica tóxica induzida por isoproterenol, o qual se assemelha ao quadro clínico humano da cardiomiopatia de Takotsubo. Métodos: Ratos Wistar de 12 semanas de idade foram alocados em dois grupos: grupo cardiomiopático (CMP, recebendo por dois dias consecutivos isoproterenol 100mg/Kg, s.c., em bolus, n= 15) e grupo controle (CON, recebendo salina, n=15). Monitorização eletro- e ecocardiográfica foi realizada em todos os animais imediatamente antes e trinta dias depois da indução da cardiomiopatia. Após a eutanásia, os corações foram excisados, pesados e divididos (corte tetracameral), as quais foram processadas para 1) histologia ou 2) extração de células não-cardiomiocíticas. Na histologia, foram avaliadas a morfometria das câmaras cardíacas, a contagem de células inflamatórias e o grau de fibrose miocárdica. Uma parte das células não-cardiomiocíticas foi plaqueada em baixa densidade para realização do ensaio de contagem de unidades formadoras de colônias semelhantes a fibroblastos (“colony forming units-fibroblasts” - CFU-F), o qual permite estimar o número de cMSCs. As células não-cardiomiocíticas remanescentes foram expandidas até a 5a passagem para avaliação da taxa de proliferação celular, bem como a habilidade para a diferenciação adipogênica e osteogênica in vitro. Resultados: Ratos CMP apresentaram maiores durações de onda P, intervalo PR e intervalo QT ao eletrocardiograma, menor fração de ejeção e dilatação ventricular esquerda ao ecocardiograma, hipertrofia cardíaca, acompanhado na histologia por infiltração inflamatória leve e fibrose miocárdica discreta. Todas estas alterações confirmaram a presença de uma cardiomiopatia ativa após os trinta dias de administração do isoproterenol. O ensaio de CFU-F revelou que os animais CMP possuem um maior número de cMSCs no coração em comparação aos ratos CON. Em adição, as cMSCs de ratos CMPs apresentaram maiores taxas de proliferação e maiores capacidade de diferenciação adipogênica e osteogênica que as de animais CON. Conclusão: Em ratos com cardiomiopatia hiperadrenérgica induzida por isoproterenol, as células tronco mesenquimais cardíacas (cMSCs) apresentam-se em maior número, com maior taxa proliferativa e maior potencial de diferenciação que os animais controles. Objetive: To evaluate some biological properties of cardiac mesenchymal stem cells (cMSCs) in a rat model of isoproterenol-induced hyperadrenergic cardiomyopathy, a surrogate for Takotsubo cardiomyopathy. Methods: Twelve weeks-old Wistar rats were allocated in two groups: cardiomyopathic (receiving for two days isoproterenol 100mg/Kg, s.c., n= 15) and control rats (receiving saline, n=15). Electro- and ecocardiographical monitoring were performed in all animals immediately before and 30 days after cardiomyopathy induction. After euthanasia, hearts were excised, weighed and processed for histology and for extracting non-cardiomyocytic cells. In the histology, cardiac chambers morphometry, inflammatory cells counting and fibrosis were evaluated. Over the non-cardiomyocytic cells, a pool was plated for a colony forming units-fibroblasts (CFU-F) assay in order to estimate the number of cMSCs. The remaining cells were expanded to assess their proliferation rates as well as their osteogenic and adipogenic differentiation abilities. Results: Cardiomyopathic rats presented higher duration of P wave, PR and QT interval at the electrocardiogram, lower ejection fraction and left ventricular (LV) dilation (higher LV end dyastolic diameter) at the echocardiogram and LV hypertrophy, accompanied at the histology by inflammatory infiltration and myocardial fibrosis, then confirming the presence of overt cardiomyopathy. CFU-F assay revealed that cardiomyopathic animals presented higher number of cMSCs into the heart, when compared to control animals. In addition, cMSCs from cardiomyopathic rats presented higher proliferative rates as well as higher osteogenic and adipogenic differentiation abilities as compared to control animals. Conclusion: In isoproterenol-induced hyperadrenergic cardiomyopathic rats, cMSCs present some functional changes in comparing with normal control animals, which may be implicated in the pathogenesis of toxic hyperadrenergic cardiomyopathy. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: