Phenotypic and genotypic characterization of Salmonella enterica of poultry origin and antimicrobial activity of propolis extracts

Autor: Benicio, Cristyene Gonçalves
Přispěvatelé: Rezende, Cíntia Silva Minafra e, Machado, Bruna Aparecida Souza, Andrade, Maria Auxiliadora, Borges, Liana Jayme, Teixeira, Weslen Fabricio Pires, Prado, Cristiano Sales, Lage, Moacir Evandro
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2019
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG
Universidade Federal de Goiás (UFG)
instacron:UFG
Popis: Objetivou-se com este estudo caracterizar fenotipicamente e genotipicamente isolados de Salmonella provenientes de amostras de origem alimentar e ambiental, além de avaliar a ação antibiótica in vitro de extratos de própolis verde e vermelha. Os 128 isolados de Salmonella enterica foram obtidos e analisados quanto à suscetibilidade antimicrobiana pelo método de difusão em disco. Os antimicrobianos e concentrações em microgramas testadas foram: amoxicilina-ácido clavulânico (30µg), cotrimoxazol (trimetropim-sulfametoxazol) (25μg), ciprofloxacina (5μg), enrofloxacina (5μg), ceftiofur (30μg), cloranfenicol (30μg), fosfomicina (200μg) e doxiciclina (30μg). As cepas Salmonella Enteritidis (ATCC 13076), Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) e Escherichia coli (ATCC 25922) foram utilizadas como controle da qualidade dos testes de sensibilidade. Foram pesquisados dois genes de virulência e nove de resistência. Dentre os 128 isolados, 40 foram testados frente a ação da própolis. Os extratos de própolis diluídos em etanol foram avaliados quanto à sua atividade antimicrobiana nas concentrações de 0,2 a 100 mg/mL-1 pela determinação da concentração inibitória e bactericida mínima. Foram encontrados 27 diferentes sorotipos, sendo os mais frequentes Salmonella Heidelberg, Saintpaul, Typhimurium e Minnesota. Verificou-se que 85,2% (109/128) dos isolados foram resistentes a um ou mais agentes antimicrobianos utilizados e apenas cinco sorotipos não apresentaram resistência. Foram identificados 54 isolados multirresistentes. Dos oito antimicrobianos avaliados, para dois deles (cloranfenicol e fosfomicina) todos os isolados foram suscetíveis e aquele com maior número de isolados resistentes foi a ciprofloxacina. Dentre os genes de resistência avaliados (blaCTX-M e gyrA), cerca de 70% (89/128) dos isolados o albergavam. Em relação aos de virulência, três (invA, hilA e sseD) foram identificados em todos os isolados testados. Para os outros seis, spvR foi o que apresentou maior número de isolados nos quais não foi identificado. Dos 18 diferentes sorotipos testados frente a ação antibiótica da própolis, o mais suscetível foi Salmonella Senftenberg e os mais resistentes: Agona, Braenderup, Heidelberg, Infantis, Minnesota, Schwarzengrund, Newport, Orion, Saintpaul e Anatum. Em geral, os menores valores de concentração inibitória e bactericida mínima foram 3,1 mg/mL e 6,25 mg/mL, respectivamente. A melhor ação antimicrobiana foi da própolis vermelha, independentemente do tipo de extração utilizada para obtenção dos extratos. Sendo assim, a própolis pode ser uma alternativa viável como antimicrobiano sob Salmonella sp por possuir potencial de ação expressivo. Buscar alternativas para o tratamento e controle de microrganismos patogênicos tem sido importante mediante o surgimento de cepas multirresistentes. The objective of this study was to characterize phenotypically and genotypically Salmonella isolates from food and environmental samples, as well as to evaluate the in vitro antibiotic action of green and red propolis extracts. The 128 isolates of Salmonella enterica were obtained and analyzed for antimicrobial susceptibility by disk diffusion method. The antimicrobials and microgram concentrations tested were: amoxicillin-clavulanic acid (30μg), cotrimoxazole (trimetropim-sulfamethoxazole) (25μg), ciprofloxacin (5μg), enrofloxacin (5μg), ceftiofur (30μg), chloramphenicol (30μg), chloramphenicol (30μg) and doxycycline (30μg). Salmonella Enteritidis (ATCC 13076), Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) and Escherichia coli (ATCC 25922) strains were used as a quality control of the sensitivity tests. Two genes of virulence and nine of resistance were searched. Among the 128 isolates, 40 were tested against propolis action. Propolis extracts diluted in ethanol were evaluated for their antimicrobial activity ranging from 0.2 to 100 mg/mL-1 by determining the minimum inhibitory and bactericidal concentration. We found 27 different serotypes, the most common was Salmonella Heidelberg, Saintpaul, Typhimurium and Minnesota. It was found that 85.2% (109/128) of the isolates were resistant to one or more antimicrobial agents used and only five serotypes showed no resistance. We identified 54 multiresistant isolates. Of the eight antimicrobials evaluated, for two of them (chloramphenicol and phosphomycin) all isolates were susceptible and the one with the largest number of resistant isolates was ciprofloxacin. Among the resistance genes evaluated (blaCTX-M and gyrA), about 70% (89/128) of the isolates harbored it. Regarding virulence genes, three (invA, hilA and sseD) were identified in all isolates tested. For the other six, spvR presented the highest number of isolates in which it was not identified. Of the 18 different serotypes tested against antibiotic action of propolis, the most susceptible were Salmonella Senftenberg and the most resistant: Agona, Braenderup, Heidelberg, Children, Minnesota, Schwarzengrund, Newport, Orion, Saintpaul and Anatum. In general, the lowest inhibitory and minimum bactericidal concentration values were 3.1 mg/mL and 6.25 mg/mL, respectively. The best antimicrobial action was for red propolis, regardless of the type of extraction used to obtain the extracts. Thus, propolis may be a viable alternative as antimicrobial under Salmonella sp because it it has expressive action potential. Seeking alternatives for the treatment and control of pathogenic microorganisms has been important through the emergence of multiresistant strains.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: